4 胃癌细胞中上调PTX3后,PCR结果显示IL4和IL10的在基因水平降低,蛋白印迹结果显示IL4,IL10以及p-JNK1/2

4.胃癌细胞中上调PTX3后,PCR结果显示IL4和IL10的在基因水平降低,蛋白印迹结果显示IL4,IL10以及p-JNK1/2表达下降。结论1.外源性PTX3通过抑制M2型巨噬细胞蛋白水平和转录水平的表达,从而抑制M2巨噬细胞的极化。2.胃癌细胞与M0巨噬细胞共培养体外模拟乳斑转移条件下,胃癌细胞中过表达PTX3后能抑制巨噬细胞向M2型巨噬细胞的极化Cytoskeletal Signaling抑制剂,促进向M1型巨噬细胞的极化。3上调PTX3通过抑制JNK1/2磷酸化,进而负调控胃癌细胞中IL4和IL10表达,从而抑制M2巨噬细胞的极化。第四部分 体内实验研究过表达PTX3在小鼠乳斑胃癌转移中相关作用目的探讨胃癌细胞PTX3对小鼠乳斑胃癌转移干性及巨噬细胞极化相关影响。方法选择615小鼠来源的胃癌细胞MFC,将过表达PTX获悉更多3(LV-PTX3)以及阴性对照(Scramble)的慢病毒载体转染后,经过稳定筛选,注射入615小鼠腹腔内,制作胃癌腹膜转移模型。在注射后的第14天(实验组和对照组各5只),脱颈处死,在避光处提取小鼠大网膜置入福尔马林中固定,行组织免疫荧光实验,通过镜下观察实验组和对照组胃癌细胞MFCs在大网膜乳斑区的转移程度。同时,通过免疫Selleck PF04929113组织化学染色,观察两组小鼠大网膜乳斑区胃癌干性指标LGR5表达变化,以及肿瘤相关巨噬细胞标志物CD86和CD206表达变化。结果1.MFCs腹腔注射后第14天,过表达PTX3实验组胃癌细胞在小鼠腹腔乳斑区的肿瘤定植数量低于对照组细胞。2.实验组小鼠乳斑区M2型巨噬细胞标志物CD206表达降低,M1型巨噬细胞标志物CD86表达增高。3.MFCs上调PTX3后,实验组小鼠乳斑区LGR5蛋白表达水平较对照组明显下降。

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