【目的】本研究对影响燕麦目标起始密码子多态性聚合酶链式反应(SCoT-PCR)的4个因素(模板DNA、引物、Mix混合液用量及退火温度)进行了优化,并通过最优体系进行了多态性引物的筛选。【方法】以4份燕麦品种DNA为模板,采用L_9(3~3)正交试验确定模板DNA、引物、Mix混合液用量的最优反应体系,在48～54JIB-04DMSO溶解度℃温度范围设置8个梯度进行退火温度筛选,并通过最优体系对80条引物进行了多态性筛选和验证。【结果】优化后的反应体系总体积为20μl,包含2μl模板DNA(10 ng·μl~(-1))、2μl引物(10μmol·L~(-1))、9μl Mix和7μl ddH_2O。筛选出了扩增效果和多态性较好的36条引物GSK3235025价格及各自的最佳退火温度。【结论】成功优化建立燕麦SCoT-PCR扩增体系,该体系的建立将为燕麦品种遗传多样性分析、品种指纹图谱构建以及分子标记辅助育种等提供重要的参考依据。
多囊卵巢综合征(PCOS)是育龄女性常见的具有高度异质性的内分泌疾病,以月经不调、性激素紊乱、生殖能力下降为主要特征。遗selleck inhibitor传因素在PCOS发病机制中发挥重要作用。近年来,通过家系、双胞胎、候选基因研究探索PCOS的遗传基因及发病机制的结论尚不统一。随着人类基因组单倍体图谱计划的实施以及高通量基因分型技术的成熟,全基因组关联研究(GWAS)等组学技术为寻找复杂多基因遗传疾病易感基因提供了更加全面、客观的研究手段。近年来,对不同种族人群PCOS开展的GWAS为进一步研究PCOS的发病机制提供了理论依据。