方法利用单向导RNA (sgRNA)在线设计工具,针对SAMHD1设计sgRNA;利用pYSY-CMV-Cas9-EF1α-Puromycin质粒载体,构建pYSY-CMV-Cas9-EF1α-PuromycinsgRNA-SAMHD1;转染HCT116细胞株,以嘌呤霉素进行筛选鉴定后,采用蛋白质印迹法检测HCT116细胞中SAMHD1蛋白表达水平;采用蛋白质印迹法检测靶向敲除AG-120SAMHD1基因后HCT116细胞株DNA损伤修复能力的变化;通过光学显微镜和CCK-8法比较Cas9-vector组(HCT116细胞中转染pYSY-CMV-Cas9-EF1α-Puromycin载体质粒,对照组)和Cas9-SAMHD1组(转染p YSY-CMVCas9-EF1α-Puromycin-sgRNA-SAMHD1靶向敲除SAMHD1质粒获悉更多,实验组)的细胞数量和增殖能力水平。结果通过酶切载体、退火产物结果和重组质粒的测序结果,验证重组质粒构建成功;蛋白质印迹法检测结果验证明利用CRISPR/Cas9系统技术靶向敲除SAMHD1的HCT116细胞株无SAMHD1蛋白表达,即Cas9-SAMHD1细胞株构建成功;蛋白质印迹法结果显示,Cas9-SAMHD1组与Cas9-vector组相比,在此网站DNA损伤诱导剂阿霉素刺激作用下DNA损伤指标γH2AX降低;光学显微镜和CCK-8结果显示,Cas9-SAMHD1组与Cas9-vector组相比,细胞增殖能力显著增强(P <0.01)。结论采用CRISPR/Cas9系统成功敲除人源结肠癌细胞SAMHD1基因后,结肠癌细胞的增殖能力和DNA损伤修复能力显著增强。
【目的】近几年随着观光农业的兴起,花色的选育和改良已成为甘蓝型油菜种质资源鉴定和材料创制的重要研究方向。

为构建糯玉米品种DNA指纹库,保护品种资源,利用Illumina公司研发的包含56 110个SNP标记的芯片,对50份糯玉米自交系进行基因分型。结果表明 按照SNP标记选用标准,共得到42 406个SNP标记。这些标记的杂合率均值为0.04,SNP缺失率均值为0.01,最小等位基因频率(MAF)均值为0.4,多态性信息含量(PIC)均值为0.38,基因多样性指数均值为0.4Elacridar临床试验4。对上述获得的SNP标记设置不同数量位点进行筛选,确定25 000位点为核心标记位点,可用于构建糯玉米自交系DNA指纹库。在25 000位点时,对50份糯玉米自交系进行SNP聚类分析,共将其划分为四大类群,聚类结果与品种系谱来源一致。该研究可为糯玉米品种特异性和一致性的鉴定分析及品种保护工作提供理论指导。
为构建一种核酸免疫胶体金的制备方法,selleck screening library将抗体与寡核苷酸共价连接,并与含互补序列的寡核苷酸修饰的胶体金杂交。紫外扫描检测显示,使用4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐(SMCC)共价偶联修饰的抗体-核酸,抗体分子修饰核酸的数量最多。通过蛋白定量、琼脂糖凝胶电泳、盐沉、pH调节等试验,比较核酸免疫胶体金和传统静电吸附方式制备的免疫胶体金的抗体结合率、目标捕获率以及探针的稳点击此处定性,并初步测试了新型探针在试纸条检测上的应用。结果表明 构建的核酸免疫胶体金的抗体结合率比传统免疫胶体金高20%,探针捕获目标的效率高40%(以蓝耳病毒为例),稳定性更好(0.5～1 mol·L~(-1)盐浓度及pH 4～10),试纸条检测有明显特异性(以蓝耳病毒为例)。这一研究成功构建了一种具有更好抗体负载率、靶病毒结合率、稳定性的核酸免疫胶体金,有望替代传统的免疫胶体金,制备更稳定更灵敏的试纸条,用于抗原、抗体及病毒的快速检测。

目的 探讨大理白族自治州汉族、白族、彝族、回族、傈僳族育龄女性5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T、A1298C及甲硫氨酸合成酶还原酶(MTRR)A66G基因多态性的频率特征。方法 以到大理白族自治州妇幼保健院做孕检的7331例女性为研究对象,其中汉族3203人,白族3140人,彝族694人,回族212人,傈僳族82人,提取口腔上皮细胞DNFosbretabulin小鼠A,采用荧光定量PCR,进行编码基因MTHFR和MTRR的相关多态性位点检测。结果 1)各民族入组对象的基因多态性分布符合遗传平衡定律;2)大理州汉族女性MTHFR 677CC、CT、TT的基因型频率分别为40.0%、45.3%、14.7%,白族女性为43.6%、44.4%、12.0%,彝族女性为45.4%、43.7%、11.0%,回族女性为4已经2.9%、43.4%、13.7%,傈僳族女性为47.6%、37.8%、14.6%,其中汉族与白族、彝族女性的MTHFR C677T基因型和等位基因频率多态性分布差异有统计学意义(P<0.05),回族与傈僳族的MTHFR C677T基因与以上民族比较无统计学差异(P> 0.05),汉族与白族的MTHFR A1298C、MTRR A66G基因型分布selleck相比较有统计学差异(P<0.05),其中汉族女性MTHFR 1298AA、AC、CC的基因型频率分别为65.2%、31.6%、3.2%,白族女性为65.8%、29.7%、4.5%,汉族女性MTRR 66AA、AG、GG的基因型频率分别为53.9%、38.1%、8.0%,白族女性为49.1%、41.9%、9.0%,傈僳族女性的MTHFR A1298C基因型频率和等位基因频率分布与汉族、白族、彝族都有统计学差异(P<0.05)。

结论以呼吸道首发的EGPA最易误诊为支气管哮喘,ANCA阳性罕见,影像学改变缺乏特征性,肉芽肿及血管炎在此类患者中并不常见。
<正>辅助生殖技术的发展使不孕患者的临床妊娠率大大提高,但仍有部分患者在多次移植优质胚胎后仍未获得临床妊娠。反复种植失败(recurrent implantation failure,RIF)已经成为PI3K/Akt/mTOR抑制剂阻碍妊娠率进一步提高的瓶颈问题,在辅助生殖助孕中RIF发生率约为10%~([1]),是生殖
<正>各国关于复发性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)的定义存在差异,我国通常将与同一性伴侣连续发生3次或3次以上的自然流产称为RSA。虽然RSA定义为连续3次或3次DMH1分子量以上,但大多数专家建议连续发生2次流产即应重视并予评估,因其再次出现流产风险与3次者相近。大约5%生育年龄夫妇遭受
目的建立基于量子点二抗偶联物的荧光免疫分析法测定牛奶中的氨苄青霉素。方法采用共价偶联的方法将Qdot 655红色荧光量子点(quantum dots, QDs)与二抗偶联,利用制备好的GSK1838705A体内QDs-二抗偶联物代替传统酶标二抗应用到检测牛奶中氨苄青霉素残留检测的荧光免疫分析方法中,并将该方法与酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)和高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)进行比较。结果该方法 50%抑制浓度(IC50)为8.3μg/L;检测限为2.5μg/L。

目的探索不同浓度乙醇对体外培养的人精子形态、前向运动力和DNA碎片指数的影响。方法采用密度梯度离心法处理精液后将回收的30份精子混悬于不同乙醇浓度的精子培养液中,其中对照组0 mg/dl(A组),实验组(低浓度)20 mg/dl(B组),C组(中浓度)80 mg/dl和D组(高浓度)160 mg/dlLazertinib。6h后检测各组正常形态精子比例、前向运动精子以及精子DNA碎片指数。结果 B组正常形态精子(9.60±2.13)%与A组(10.23±2.48)%相比,差异无统计学意义(P=0.128)。C组(8.03±1.96)%和D组(5.23±1.23)%正常形态精子低于A组,差异有统计学意义(P=0Ispinesib体内.011,0.000)。前向运动精子比例依次下降[A组(73.03±2.83)%,B组(63.13±4.22)%,C组(53.03±3.05)%,D组(45.07±2.97)%],差异有统计学意义(F=283.454,P=0.000)。D组精子DFI(20.30±5.06)%,高于A组(12.Selleck37±3.68)%、B组(12.67±3.78)%和C组(15.70±4.06)%,差异均有统计学意义(P=0.000,0.000,0.001),B组、C组精子DFI高于A组,但差异均无统计学意义(P=0.804,0.339),B组与C组精子DFI比较,差异亦无统计学意义(P=0.478)。结论乙醇可降低体外培养精子的运动力、正常形态精子的比例,升高精子DNA碎片指数。

治疗后2组患者TXB_2、6-keto-PGF_(1α)均较治疗前明显升高(P<0.05),治疗组TXB_2明显高于对照组(P<0.05)。治疗组治疗后心绞痛症状疗效及心电图疗效情况均明显优于对照组(P<0.05)。结论 基于通补宗气法选穴针刺治疗心绞痛疗效显著,并能调节血管活性因子水平,改善患者血管内皮功能。
目的CYT387分子量 探讨3R护理法联合认知训练对血管性认知障碍患者认知功能及生活质量的影响。方法 选取徐州市中心医院2017年8月-2019年7月收治的60例血管性认知障碍患者,根据入院先后顺序将其随机分为治疗组和对照组,每组30例。对照组给予常规护理,治疗组在对照组基础上给予3R护理法联合认知训练。比较两组MMSSelleckE及ADL评分。结果 护理前两组MMSE及ADL评分比较差异均无统计学意义(P>0.05);护理后,治疗组MMSE及ADL评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 3R护理法联合认知训练可以提高血管性认知障碍患者的认知功能,且改善患者的生活质量,具有一定的临床指导意义,值得临床推广Ipatasertib价格。
目的 观察阿利沙坦酯联合非布司他对高血压伴高尿酸血症患者血管弹性功能及内皮状态的影响程度。方法 选取本院2018年1月-2019年7月期间收治的60例高血压伴高尿酸血症患者为研究对象,将其随机分为A组和B组,每组各30例。A组采用阿利沙坦酯进行治疗,B组采用阿利沙坦酯联合非布司他进行治疗。比较两组患者治疗前后的收缩压、舒张压、尿酸、血管弹性功能及内皮状态相关指标。

根据孕8周前甲状腺筛查结果及是否接受L-T4治疗分为研究组(129例,TPOAb阴性SCH孕妇及其子代,采用L-T4治疗)、对照组(38例,TPOAb阴性SCH孕妇及其子代,未采用L-T4治疗)和正常对照组(83例,甲状腺功能正常的孕妇及其子代)。结果 3组子代血清TSH和FT_4水平比较,差异均无统计学意义(均P>0. 05)。3组子代智力发育评分比较,差此网站异无统计学意义(P>0. 05)。3组子代运动发育评分比较,差异无统计学意义(P>0. 05)。结论孕早期确诊的TPOAb阴性的SCH孕妇及时采用L-T4治疗可能会避免子代智力发育和运动发育的落后。
目的研究盆底康复治疗对流产所致不孕不育患者封闭抗体表达的影响及意义。方法选取2016年2月-2017年2月在该院妇产科就Kinase inhibitor Library诊的不孕不育患者60例为研究对象,分为流产致不孕不育组和不孕不育组,每组各30例。两组患者均实行腹部训练结合盆底肌锻炼,联合盆底康复仪进行电刺激治疗,采用酶联免疫吸附法检测封闭抗体表达,流式细胞仪检测外周血CD3、CD4、CD8数量,化学发光免疫分析法检测孕酮、β-h CG水平,压力探头检测盆底肌力,彩色多勒普超声仪检测子宫内膜壁,CH5424802浓度分析盆底康复治疗对流产所致不孕不育患者的影响。结果治疗后,两组患者封闭抗体阳性表达率高于治疗前,阴性表达率显著低于治疗前,差异有统计学意义(P<0. 05);治疗后,流产致不孕不育组封闭抗体阳性表达率显著高于不孕不育组,封闭抗体阴性表达率低于不孕不育组,差异有统计学意义(P<0. 05)。治疗后,流产所致不孕不育组外周血CD3、CD4数量低于不孕不育组,CD8数量高于不孕不育组,差异有统计学意义(P<0. 05)。

为检测鲤鱼中苯并咪唑类药物残留,降低其对人体造成的危害,本文基于单克隆抗体之上建立胶体金试纸条检测方法。首先以2-甲氧基羰基氨基-3H-苯并咪唑-5-羧酸为半抗原,用活化酯法偶联蛋白质制备免疫原,免疫小鼠,进行细胞融合制备单克隆抗体,而后用合成的胶体金标记单克隆抗体制备胶体金试纸条。通过间接竞争ELSIA法(ic-ELISA)测得阿苯达唑、通常甲苯咪唑、阿苯达唑亚砜、阿苯达唑砜、芬苯达唑、氟苯咪唑、奥芬达唑的半抑制浓度(IC50)分别为0.44、0.16、3.47、5.62、0.62、0.10、5.77 ng/mL。胶体金试纸条在鲤鱼中的阿苯达唑、甲苯咪唑、阿苯达唑亚砜、阿苯达唑砜、芬苯达唑、氟苯咪唑、奥芬达唑的检测限分别为4、2、50、100、10、1、100 ng/JNK signaling 抑制剂sg,检测时间为15 min。因此,该方法灵敏度高、成本低、速度快且无需仪器辅助,适宜现场大量鲤鱼样本的快速检测。
<正>抗内皮细胞抗体(AECA)是一类针对内皮细胞结构组成的一种复杂抗体,其以血管内皮细胞(EC)表面或吸附于EC表皮的一组异质性抗原为作用靶标,通过形成免疫复合物发挥破坏内皮细胞的作用,从而导致血管损伤SB-715992,使患者产生与之相关的一系列临床症状。较多研究表明,AECA不仅广泛参与了临床疾病的发病机制,还与疾病病情活动呈正相关。AECA可能作为一种有价值的血清学指标,用于对临床疾病的诊断、治疗及预后。近年来有关AECA与临床部分疾病相关性的研究不断涌现,本文就相关研究予以综述。
膜性肾病是一种常见原发性肾小球肾病,是导致终末期肾脏病的主要原因之一,根据其病因是否明确可分为原发性膜性肾病和继发性膜性肾病。

方法横断面回顾性研究。年龄≤18岁、屈光度>-6.00D的青少年高度近视患者544例1050只眼纳入研究。所有患眼均行散瞳电脑验光及检影验光获得最佳矫正视力(BCVA),并将其转换为最小分辨角对数(logMAR)视力记录。均行裂隙灯显微镜及以黄斑为中心、45°眼底后极部彩色照相检查。排除眼底模糊、眼位不正及判定有异议的图像资料,选取视盘边缘及黄斑区清晰哪里可见的彩色眼底像进行眼底特征分析。最终988只眼的彩色眼底像纳入统计分析,占94.1%。以脉络膜血管暴露程度判断其豹纹状眼底程度并进行分级,观察黄斑区、视盘区豹纹状眼底分级。通过Image J软件,测量视盘旁β区萎缩弧面积、视盘最长径、视盘最短径,并以视盘最长径/最短径比值作为视盘倾斜指数。对比分析豹纹状眼底分级、视盘旁β区萎Thiazovivin缩弧面积、视盘倾斜指数与屈光度、BCVA的相关性;观察统计局限性后极部视网膜脉络膜萎缩灶、漆裂纹、Fuchs斑等高度近视后极部眼底病变的发生率。结果患眼平均屈光度为(-10.66±2.63)D;平均logMAR BCVA为0.11±0.22。豹纹状眼底发生率为66.9%。黄斑区、视盘区豹纹状眼底平均分级分别为(0.83±0.9MEK 抑制�?review6)、(1.04±1.00)级,二者具有高度相关性(r=0.875,P=0.000)。视盘旁β区萎缩弧发生率为97.3%,视盘旁β区萎缩弧平均面积为(0.45±0.57)mm~2。视盘倾斜发生率为28.5%,平均视盘倾斜指数为1.25±0.18。黄斑区、视盘区豹纹状眼底不同分级患眼平均屈光度、logMAR BCVA以及视盘旁β区萎缩弧面积、倾斜视盘发生率、视盘倾斜指数比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。

目的分析纳米丝素纤维敷料促进大鼠深度烧伤创面愈合效果。方法选取40只SD雄性大鼠建立深Ⅱ度烧伤模型,建模成功后将大鼠随机分为模型组(n=20)和观察组(n=20)。模型组烫伤后予以常规纱布覆盖创面处理,观察组采用纳米丝素纤维敷料覆盖创面处理。观察两组大鼠敷药后1、2、3周MAPK Inhibitor Library后的创面愈合率、新生毛细血管数、成纤维细胞计数。结果观察组大鼠敷药1周后的创面愈合面积,新生毛细血管数,成纤维细胞计数要明显优于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组大鼠敷药2周后创面愈合面积,新生毛细血管数和成纤维细胞计数均明显优于模型组,差异有统计Fer-1核磁学意义(P<0.05)。观察组大鼠敷药3周后创面愈合面积明显高于模型组,新生毛细血管数和成纤维细胞计数低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论纳米丝素纤维敷料能明显促进大面积深度烧伤创面愈合,促进新生毛细血管和成纤维细胞再生,缩短深度烧伤的愈合时间。 Selleck OICR 9429
目的探索肺部感染对胃癌患者术后肾素-血管紧张素-醛固酮系统(Renin-angiotension-aldosterone system,RAAS)的影响。方法选取2016年2月-2019年10月于海南省三亚中心医院接受治疗的248例胃癌手术患者为研究对象,根据患者术后是否发生感染分为感染组(n=36)和未感染组(n=212)。