第一部分HDAC抑制联合DNA损伤药物对细胞的杀伤作用的影响和内在的作用机制 目的：通过MTT检测新合成的NL101和苯达莫司汀对细胞增殖的影响，并对NL101具体作用机制进行研究。 方法：分别用NL101和苯达莫司汀处理KM3和8226细胞系，利用MTT法检测对细胞增殖的影响和Western-blot检测凋亡相关的γH2AX。另外检测NL101处理细胞后组蛋白乙酰化查找更多相关蛋白的表达。 结果：与苯达莫司汀相比，NL101能显著提高对细胞的杀伤能力，并通过检测发现NL101和HDAC抑制剂SAHA具有类似的作用，细胞经过NL101处理后，NL101可以显著增加乙酰化组蛋白H3的表达。 结论：NL101具有和苯达莫司汀相似的细胞毒作用，同时还具有抑制HDAC的功能。 第二部分HDAC抑制剂SAHA处理细胞后DN通常A损伤修复通路中基因mRNA水平的变化 目的：通过real-time PCR检测HDAC抑制剂SAHA处理细胞后参与修复苯达莫司汀引起细胞损伤的通路中基因mRNA表达情况，进一步验证这些表达和以往研究报道是否一致。 方法：用一定浓度的SAHA处理Hela细胞，DMSO溶剂作为空白对照，6-8小时后收细胞RNA反转录成cDNA，构建筛选基因reAutophagy inhibitoral-time PCR引物，检测筛选基因mRNA表达水平的变化。 结果：共统计了60个基因，SAHA处理后，细胞中CBP、TIP60、MORF、EP300、MSL1、TYMS的mRNA表达明显下降，表明HDAC抑制剂确实能下调某些基因的表达，同时也进一步验证了基因芯片的结果。 结论：HDAC抑制剂处理细胞后确实能下调参与DNA修复通路中基因mRNA的表达，HDAC抑制剂可能通过下调DNA修复相关基因而影响药物的敏感性。

体外抗肿瘤活性表明,甲酰胺基团连接在电子云密度大的吡咯环上有利于活性,连接在缺电子的吡啶环或成尿嘧啶环时活性大幅度下降甚至消失,7-氮杂吲哚类化合物具有良好的PARP1抑制活性,1μM浓度下抑制率为48.95%；而其它两类化合物的PARP1抑制活性均较低。 同时Sorafenib购买,基于呔嗪酮类化合物AZD2281具有良好的PARP1抑制活性和化学增敏性(增加肿瘤细胞对化疗药物的敏感性),本文设计合成17个呔嗪酮类衍生物(2-8～2-18,2-25～2-30)以增加该类化合物的多样性,考察呔嗪酮4位取代基对活性的http://www.selleck.cn/B-Raf.html影响。初步体外抗肿瘤活性表明,4位取代基由取代亚甲基替换为甲酰胺基后,活性大幅度下降,证明除文献阐述的尼克酰胺结合位点外,临床候选药物AZD2281与PARP1蛋白有其他关键结合位点,尚待研究。
聚ADP核糖聚合酶（Poly（ADP-GSK2656157浓度ribose）polymerase，PARP）是一种参与DNA修复的核酶，在DNA损伤修复中起重要作用，为肿瘤的治疗提供一个新的靶点。因此，PARP抑制剂一直是近年来的研究热点，部分抑制剂已进入临床试验阶段。本论文对PARP抑制剂进行体外筛选并初步评价其药效，这为筛选有自主知识产权的新型PARP抑制剂奠定了基础。

在吉非替尼作用下,Lovo、HT29和HCT116细胞的PTEN表达均无明显变化。 5、吉非替尼诱导的生长抑制作用可通过调控细胞周期和凋亡:10μmol/L吉非替尼作用于结肠癌细胞,Lovo细胞G1期比例从(59.49±1.74)%明显增加到(76.25±3.0有1)% (P<0.05)。MET基础表达及其活性与吉非替尼敏感性无明显关系。结果提示IGFR-1β基础活性增高与结肠癌细胞耐受吉非替尼有关;其次,在吉非替尼作用下,Lovo细胞IGFR-1β表达及其活性变化不明显,HT29细胞IGFR-MDV31001β表达无改变,但其活性明显升高(P0.05)。AG1024可降低HT29细胞IGFR-1β活性,但不能明显抑制AKT和MAPK的活性,而联合吉非替尼作用于细胞AKT和MAPK的活性显著被抑制(P<0.05)。AG1024可阻断HCT1点击此处16细胞IGFR-1β活性,AKT和MAPK的活性也随之显著被抑制(P0.05)。提示AG1024单独和联合吉非替尼可相应抑制HCT116和HT29细胞中AKT、MAPK的持续活化;联合吉非替尼和AG1024使HT29细胞增殖率显著下降,细胞G1期阻滞,凋亡增加(P0.05)。结果提示AG1024可逆转细胞耐受表型。

白细胞计数是CML的特征,将CML患者按最初诊断时白细胞计数＞100×109/L为界分为2组,结果发现CML初诊时白细胞计数>100×109/L组Axl表达明显增高(P=0.0395),差异有统计学意义。 结论 1.CML患者和骨髓象正常的非恶性血液性疾病的人均表达Axl mRNA。 2.治疗失败组的Axl mRNA表trans-isomer化学结构达水平高于治疗有效组,提示Axl可能与CML患者应用IM治疗耐药发生有关。 3.AXL表达与患者性别、年龄、平均血红蛋白水平、平均血小板计数、外周血幼稚细胞比例、脾脏大小无明显相关。AXL表达与CML患者初诊时白细胞计数明显增高有关。
第一部分 循环血IGF-1及IGFBP-3水平与肺癌发病PR 171风险研究目的：胰岛素样生长因子(IGF)系统在肿瘤形成中发挥重要作用,而肺癌是发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一。我们开展了一项Meta分析探讨循环IGF-1及IGFBP-3水平与肺癌发病风险的关联性。方法：我们就与肺癌患者循坏IGF-1及IGFBP-3水平相关的前瞻性病例对照试验和病例对照试验并且的研究进行了系统的文献检索。经过严格的纳入和排除标准筛选,共纳入6项巢式病例对照研究(1043例病人及11472例对照)和8项病例对照研究(401例病人及343例正常对照)。我们以多因素校正的OR值及其95%CIs来合并计算循环IGF-1和IGFBP-3水平与肺癌发生率之间的关联性同时,我们计算了标准化均差(SMD)来比较病例组和对照组循环IGF-1和IGFBP-3的差异。

方法将20只裸鼠随机分成A、B组,每组10只,分别侧腹部皮下注射对数生长期的MCF-7和MCF-7Raf-1细胞2×106个,建立裸鼠移植瘤模型。12周后处死裸鼠,原代培养裸鼠移植瘤细胞。采用Western blot法检测EMT的上皮细胞标志物E-cadherin、β-catenin和间质标志物vimentin,以及AURKA、总正丝裂原活化蛋白激酶(tMCP-690550体外APK)及磷酸化MAPK(p-MAPK)。采用AURKA抑制剂处理MCF-7Raf-1移植瘤细胞48、72 h,采用Western blot法检测E-caherin、β-catenin、vimentin蛋白。结果肿瘤细胞移植后4、8、12周,B组移植瘤体积均大于A组(P均<0.05);与A组比较,B组移植瘤细胞E-caherin、购买UMI-77β-catenin蛋白相对表达量降低,vimentin、p-MAPK、AURKA蛋白相对表达量增加,P均
目的:筛选诱导巨核细胞倍体化药物,研究倍体化细胞的抗死亡机制,探索促进倍体化细胞死亡的用药方法。方法:采用不同药物处理巨核细胞白血病细胞系Dami细胞,检测细胞倍性、衰老、死亡及相关分子的变化。结果:Nocodazole、SGW3965分子重量P600125与SU6668可阻断Dami细胞增殖,诱导倍体化,促进细胞衰老,短期诱导不影响细胞活力。分子水平表明,抗凋亡分子存活蛋白表达上调,衰老相关分泌表型调控因子NF-κB(p65)活性降低。持续的药物诱导可致细胞死亡。结论:诱导巨核细胞倍体化抑制恶性增殖,促进细胞衰老发生,存活蛋白与NF-κB(p65)共同抑制倍体化和衰老细胞的死亡,而持续的药物诱导可促进细胞死亡,可作为急性巨核细胞白血病的治疗策略。

作为世界最大甘薯生产国，我国甘薯加工目前仍以淀粉类产品为主，对其块根中特有的贮藏蛋白sporamin尚无利用，一般随淀粉厂废水直接排放，污染水质和周围环境。有研究表明sporamin具有良好的乳化性和营养价值，并可抑制癌细胞的增殖。本研究探索了淀粉加工废水中蛋白质的回收方法，并通过细胞和临床试验探索了sporamin对恶性肿瘤细胞的抑制效果及分子作用机制，旨在所以为合理利用甘薯蛋白资源及开发新型抑癌药物提供依据。 首先探索了“自然发酵+泡沫分离”工艺回收甘薯蛋白这一新方法的可行性。将提取淀粉后的浆液25℃室温自然发酵0、1、4、7、10、13天后，以空气为载体(表观气流速度90cm/min)经气体分布器(Φ1540μm)向泡沫柱鼓气，回收泡沫液，计算蛋白回收率和富集比。结果：随发酵时间延长，浆液pWortmannin半抑制浓度H值和蛋白质含量均逐渐降低，两者呈正相关(R=0.828，P=0.042)。7天后，pH从6.57±0.15降低到3.40±0.00(P＜0.05)，此时回收率和富集比达最高，分别为87.9±6.07%和1.55±0.11，随后逐渐降低。从成本-效益角度考虑，发酵4-7天比较可取。SDS-PAGE显示回收蛋白主要为sporamin，随发酵Dinaciclib时间延长，sporamin A含量显著下降。胰蛋白酶抑制剂(TI)活性染色显示所得蛋白仍具有TI活性。结论：“自然发酵+泡沫分离”工艺是可行的回收甘薯淀粉加工废液中蛋白质的新方法，且成本低、工艺简单。 MTT试验和结晶紫染色试验显示，sporamin在体外对人肝癌HepG2细胞、人乳腺癌BCAP-37细胞及人结肠癌HT-29细胞增殖均有显著抑制作用，半数抑制浓度(IC50)分别为4.44μM、5.12μM和4.82μM。