This concept was designed to describe a material combining diagnosis,treatment and follow up of a disease.It evolved and included molecular targeting and nanotechnologies that incorporate both diagnosis and therapeutics.In this editorial,we are presenting briefly the concept and evolution of theranostics,highlighting

many applications of theranostics in daily practice and discussing future perspectives and aspects of this model in gastrointestincal cancers.
目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)、HER-2/neu蛋白在胃癌中的表达及其与预后的关系。方法回顾性分析2006年11月至2013年11月我院收治的90例胃癌患者(观察组)的临床资料,另选取正常胃组织50例作为对照组。观察2组EGFR、HER-2/neu蛋白的表达情况,分析胃癌组织中EGFR、HER-2/neu蛋白表达和临床病理特征的关系。结果观察组EGFR、HER-2/neu蛋白表达阳性率高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05),而与胃癌分化程度、临床分期、浸润深度、淋巴结转移、远处转移密切相关,差异均有统计学意义(P
目的探讨2011年4月至2015年4月基础和临床研究关于棘皮动物微管相关类蛋白4与间变性淋巴瘤激酶(EML4-ALK)融合基因在肺腺癌中的表达特点及临床意义。方法通过万方医学网和贵州省数字图书馆数据库文献法查询,对5年来发表在国内的有关EML4-ALK的文献进行收集整理和分析。结果共收集符合纳入标准文献21篇,研究病例2

这个 并且 550例,总结发现在肺腺癌中,EML4-ALK的检出率为9.61%,不同检测方法检出结果存在一定差异。结论 EML4-ALK在肺腺癌中呈低表达趋势,与肺腺癌的发生、发展有关,可作为新的治疗靶点,但检测方法仍需进一步研究和优化。
以3,4,6-三氯哒嗪和4-碘吡唑为起始原料,分别与芳胺、碘甲烷、N-Boc哌啶-4-甲磺酸酯和2-(2-溴乙氧基)四氢-2H-吡喃通过取代、氧化和Suzuki等反应,合成了16个新型的1-H-[1,2,3]三氮唑并[4,5-c]哒嗪类化合物,其结构经1H NMR和ESI-MS表征。
本文针对转化医学发展现状和本科药理学教学现状,分析探讨了将转化医学思想应用到药理学教学过程中的目的、具体实施方法和思路以及推广过程中可能存在的困难及不足,为基础医学应用型教学模式的改革提供参考。
目的探讨心理干预措施对非小细胞肺癌化疗患者负性心理反应的作用及其对生活质量的影响。方法选择2012年10月至2014年12月间收治的98例肺癌患者,采用随机数字表法随机分为研究组(51例)和对照组(47例)。研究组患者在常规化疗方案的基础上进行心理干预,对照组患者行常规化疗方案。采用抑郁自评量表(SAS)、焦虑自评量表(SDS)和中国癌症化疗患者生活质量调查问卷(QLQ-CCC)评价并比较两组患者的干预效果。结果护理干预前后,两组患者症状自评量表(SCL-90)各因子评分比较显示,干预前两组间各因子的差异均无统计学意义(P>0.05),干预后研究组患者各因子评分均明显降低(P0.05),且研究组患者的各因子评分均低于对照组(P0.05)。干预第8周时,研究组患者评分显著低于首次测评(P0.05),且研究组患者显著低于对照组(P0.05)。护理干预第8和16周时,研究组患者各方面评分均低于对照组(P<0.05)。结论心理干预可以明显改善非小细胞肺癌患者的心理障碍,提高患者的生活质量。
Gastric

cancer is one of AUY-922化学结构 the most common malignancies worldwide.The overall prognosis remains poor over the last decades even though improvements in surgical outcomes have been achieved.A better understanding of the molecular biology of gastric cancer and detection of eligible molecular targets might be of central interest to further improve clinical outcome.With this intention,first steps have been made in the research of growth factor signaling.

1 mg·L~(-1))和高剂量(1.0 mg·L~(-1))LPS处理24 h,检测LDH和SOD活性。在LPS处理前45 min,分别加入p38抑制剂SB203580和ERK抑制剂U0126处理IMR-32细胞,观察MAPK信号系统对神经元CYP2E1表达的影响。采用具有多巴胺能神经元特征的SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞系建立高表达CYP2E1细胞系,并与正常SH-SY5Y细胞同时给予低剂量(0.1

mg·L~(-1))和高剂量(1.0 mg·L~(-1))LPS处理24 h后检测LDH和SOD活性。结果与对照组相比,高剂量LPS处理IMR-32细胞,SOD的活力下降15.0%(P<0.01),LDH上升1.38倍(P<0.01),蛋白水平升高1.19倍(P<0.05)。p38和ERK抑制剂可拮抗高剂量LPS对CYP2E1的诱导作用。低剂量LPS处理CYP2E1高表达SH-SY5Y细胞,LDH的升高幅度较非高表达的对照组上升了1.28倍(P<0.01),SOD活力下降幅度增加了3.53倍(P<0.01);高剂量LPS使得CYP2E1高表达SH-SY5Y细胞LDH的升高幅度较非高表达的对照组上升了1.54倍(P<0.01),SOD活力下降幅度增加了2.17倍(P
目的探索钙卫蛋白(S100A8/A9)、Toll样受体4(TLR-4)及丝裂原活性的蛋白激酶(MAPK)信号传导途径在动脉血栓中的表达及与环氧化酶-2(COX-2)的关系。方法

为什么 24只SD大鼠分为实验组和对照组,实验组利用FeCl_3溶液建立颈动脉血栓大鼠模型,对照组注射等量生理盐水。分别于造模后第1、3、7、14日分批处死2组大鼠,每次每组3只。利用ELISA检测大鼠外周血S100A8/A9水平。采用Western blotting对SD大鼠外周血白细胞中COX-2、p-p38 MAPK、TLR-4水平进行检测,并分析各因子水平之间的相关性。利用MAPK抑制剂SB203580对模型大鼠进行干预,观察对COX-2蛋白水平的影响。结果实验组大鼠外周血S100A8/A9水平在造模后第7日达到最高值,第14日回落,且均显著高于对照组相应时间点水平(P
P38MAPK是丝裂原活化蛋白激酶(MAPKS,mitogen-activated PF-02341066细胞系 kinase)的一个亚类,有关P38MAPK信号通路在肾缺血/再灌注损伤中与细胞凋亡关系的研究国内外很少。本研究通过检测肾缺血/再灌注不同时间点细胞凋亡及P38MAPK的变化,来揭示肾缺血/再灌注损伤的病理机制。 一、材料和方法 1.实验材料:P38MAPKinase磷酸化抗体、P38MAPKinase特异性抑制剂SB203580、HRP抗体购于Calbiochem公司。TUNEL试剂盒购于博士德生物工程有限公司。60只180g～200g雄性SD大鼠由山西医科大学实验动物中心提供。
目的 探讨丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对转化生长因子(TGF)β1致人腹膜间皮细胞(HPMC)高表达纤连蛋白(FN)、纤溶酶原激活物抑制物(PAI)1的调控作用。方法 采用胰蛋白酶消化法从人腹膜组织中分离间皮细胞,建立稳定的体外培养模型。用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)评估TGF-β1和细胞外信号调节激素(ERK)及p38阻断剂对HPMC的增殖作用。采用酶联免疫双抗夹心法检测HPMC培养液中FN、PAI-1的蛋白质水平。采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测HPMC细胞内FN、PAI-1mRNA的表达。结果 (1)TGF-β1能刺激HPMC增殖(P<0.05),且呈剂量时间依赖性,加ERK阻断剂组或p38阻断剂组较TGF-β1组有明显抑制作用(P<0.01);加ERK阻断剂组或p38阻断剂组能使上述高表达受到抑制(P
目的:探讨p38信号转导途径在幽门螺杆菌(Hp)诱导胃上皮细胞株MKN45(来源于低分化腺癌)IL-8蛋白分泌中的作用。方法:以特异性p38有丝分裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated

protein kinase,MAPK)抑制剂SB203580与MKN 45作用2 h,Hp标准菌株CCUG17874与MKN 45共同孵育24 h,ELISA法检测IL-8表达产物的量。结果:Hp显著增加了IL-8在胃上皮细胞株MKN 时间 45的分泌,以细菌细胞数比为100时分泌量最高,作用24 h时IL-8量达峰值;经终浓度为0.3、1、3、10μmol/L的SB203580作用后,Hp诱导的胃上皮细胞IL-8蛋白的分泌分别减少了28％、49％、60％、76％。结论:Hp诱导胃上皮细胞株MKN45分泌IL-8,MAPK抑制剂明显地抑制该分泌作用,提示该分泌作用可能依赖于p38信号转导途径。
目的:研究p38激酶在绿茶提取物中的表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)-Epigallocatechin-3-gallate,EGCG]抗晶状体上皮细胞增殖机制中的作用。 方法:用噻唑蓝比色法(MTT比色法)研究p38的特异性抑制剂SB203580对EGCG抑制晶状体上皮细胞增殖作用的影响;用Western Blot法研究EGCG对p38激酶的磷酸化和非磷酸化水平的影响。 结果:(1)预先加入25μmol/L,50μmol/L的SB203580孵育1h后,100μmol/L EGCG对晶状体上皮细胞增殖的抑制率低于对照组,但这种差别没有统计学上的意义(P>0.

1.1.2p38抑制剂对芥子气染毒HaCaT细胞IL-6和IL-8分泌的影响 采用芥子气染毒HaCaT细胞模型，观察了p38抑制剂SB203580、BIRB796以及活性化合物p38-98、p38-99对染毒细胞炎性介质分泌的影响。结果表明，SB203580、BIRB796、p38-98、p38-99均可显著地抑制炎性细胞因子IL-6和趋化因子IL-8的分泌，并呈良好的剂量依赖关系。在两种p38抑制剂代表化合物中，BIRB796抑制作用强于SB203580。 2.1.2p38抑制剂抗芥子气损伤整体动物水平药效评价 2.1.2.1p38抑制剂对芥子气耳郭染毒小鼠皮肤损伤的影响 染毒前24h、30min以及染毒后12h腹腔注射给予SB203580、BIRB796以及活性化合物p38-98、p38-99（10mg/kg），考察了上述p38抑制剂对染毒皮肤损伤的影响。结果表明，除SB203580外，BIRB796、p38-98、p38-99对耳肿胀均有一定的抑制趋势，抑制率分别是20.5%、17.4%和17.8%。

2.1.2.2p38抑制剂对芥子气全身中毒小鼠存活的影响 采用芥子气40mg/kg（LD99）进行皮下注射染毒建立芥子气全身中毒模型，静脉注射给予p38抑制剂SB203580、BIRB796以及活性化合物p38-98、p38-99（5mg/kg/d），观察小鼠染毒7天内的死亡情况。结果表明，模型组小鼠于染毒第5天全部死亡，药物处理组小鼠分别于染毒第6天和第7天全部死亡，提示p38抑制剂对全身中毒小鼠的存活率无明显影响 2.1.2.3p38抑制剂中活性化合物代谢稳定性研究 采用大鼠肝微粒体模型，对SB203580、BIRB796、p38-98、p38-99进行初步的代谢稳定性分析。结果表明，p38-98在大鼠肝微粒体中孵育60min后原型剩余量达到50%。提示p38-98具有较好的代谢稳定性。 那个 2.1.3SB203580和BIRB796抗芥子气损伤机制研究 从药效评价结果可知，变构型p38抑制剂BIRB796对芥子气炎性损伤的保护作用强于竞争性p38抑制剂SB203580。本研究从对应激活化蛋白激酶（stress-activated

NVP-BGJ398 proteinkinases，SAPKs）c-Jun氨基末端激酶（c-Jun Nterminal kinase，JNK）与p38活性的影响的角度，对SB203580和BIRB796的抗炎机制进行了考察。 2.1.4芥子气诱导染毒HaCaT细胞p38和JNK激酶活化 首先采用Luminex液相芯片技术，考察了芥子气对HaCaT细胞p38与JNK磷酸化的影响。结果表明，芥子气可迅速诱导p38和JNK激酶磷酸化水平升高，并在染毒后0.5h达到高峰。 2.1.5p38抑制剂对SM诱导p38和JNK激酶活化的影响 进而采用Luminex液相芯片技术和Western Blotting，检测SB203580和BIRB796对染毒HaCaT细胞p38和JNK激酶磷酸化的影响。结果表明，BIRB796可同时抑制芥子气诱导的p38和JNK激酶的磷酸化，而SB203580抑制p38激酶的磷酸化，却引起JNK激酶磷酸化程度升高。 综上可知，p38抑制剂对染毒细胞模型有显著的保护作用，对染毒皮肤损伤有一定保护趋势。相比SB203580，BIIRB796保护作用更明显，这可能与BIRB796同时抑制芥子气诱导的p38和JNK磷酸化，而SB203580抑制p38却代偿性引起JNK磷酸化升高有关。 3.程序性坏死抑制剂抗芥子气损伤作用评价 程序性坏死是近年来发现的一种由死亡受体介导的caspases非依赖性细胞死亡模式，在凋亡被抑制的情况仍可介导细胞坏死，其在炎症性病变、缺血性心脑血管病、神经退行性疾病等多种疾病的发生发展及肿瘤细胞的耐药方面具有重要意义。DNA烷基化损伤可诱导细胞程序性坏死。而关于程序性坏死是否参与了芥子气诱导的细胞损伤目前尚无报道。本研究首次进行了程序性坏死抑制剂抗芥子气损伤作用的研究。 3.1程序性坏死抑制剂对染毒HaCaT细胞存活的影响 采用芥子气染毒HaCaT细胞模型，同时加入凋亡抑制剂z-VAD-fmk阻断细胞凋亡，观察程序性坏死抑制剂Nec-1对细胞存活的影响。结果表明，Nec-1、z-VAD-fmk单用时对芥子气所致HaCat细胞死亡具有明显保护作用，两者合用时对细胞的保护作用明显增强，细胞存活率接近100%。提示，程序性坏死参与芥子气诱导细胞死亡。

3.2程序性坏死抑制剂对芥子气染毒小鼠耳郭肿胀的影响 进一步，对程序性坏死抑制剂抗芥子气所致皮肤损伤的作用进行评价。结果表明，染毒前腹腔注射给予Nec-1（4mg/kg）和z-VAD-fmk（10mg/kg）对染毒耳肿胀均无明显影响。 4.免疫抑制剂抗芥子气损伤的药效评价 FTY720可通过降低外周血淋巴细胞数从而降低机体免疫反应，目前其治疗肾移植排斥反应已进入Ⅲ期临床研究阶段，对类风湿性关节炎模型的改善作用也已取得初步疗效。本研究采用小鼠芥子气耳郭皮肤染毒模型，考察了S1P抑制剂FTY720对芥子气染毒小鼠皮肤损伤的影响。结果表明，提前3天按1mg/kg/d连续灌胃给予FTY720对芥子气染毒小鼠耳郭肿胀无明显影响。 5.中药制剂抗芥子气损伤的药效评价 七叶皂苷钠具有抗炎抗渗出的作用，并可促进体内皮质醇类化合物的分泌。结果表明，七叶皂苷钠凝胶涂抹给药及腹腔注射给药（5mg/kg）对芥子气染毒小鼠耳郭肿胀均无明显影响。 Etoposide分子量 三、抗炎药物与其他药物合用抗芥子气损伤的药效评价 芥子气损伤机制复杂，单一药物的疗效有限，因此，为提高治疗效果，需要针对不同的损伤机制采用联合用药和综合性治疗措施。聚(ADP-核糖)聚合酶（Poly(ADP-ribose)polymerase，PARP）是目前外军认为最有前景的抗芥子气损伤的治疗靶点。本课题进一步考察了抗炎药物与PARP抑制剂合用对抗芥子气损伤的保护作用。 1.吲哚美辛与PRAP抑制剂合用对小鼠耳郭染毒模型的影响 染毒前给予非甾体抗炎药吲哚美辛（10mg/kg，po）和PARP抑制剂MUS003（200mg/kg，ip），考察两者合用对芥子气染毒皮肤损伤的影响。结果表明，低剂量芥子气染毒条件下，吲哚美辛组与两药合同组均可降低耳肿胀程度，抑制率分别为45.0%和19.1%。高剂量芥子气染毒条件下，MUS003、吲哚美辛及药物合用组均可降低耳肿胀程度，抑制率依次是21.8%、28.9%和32.4%。 2.奥伐尼与PRAP抑制剂合用对小鼠耳郭染毒模型的影响染毒前给予辣椒素受体激动剂奥伐尼（0.5mg/耳，涂抹）与PARP抑制剂MUS003（200mg/kg，ip），考察两者合用对芥子气染毒皮肤损伤的影响。结果表明，低剂量芥子气染毒条件下，奥伐尼组与药物合同组均可降低耳肿胀程度，抑制率分别为56.9%和72.2%，且两药抑制耳肿胀具有显著地交互作用。在高剂量芥子气染毒条件下，MUS003组与合用组均可降低耳肿胀程度，抑制率为6.5%和28.3%。 结论 1.

针形电极置于大鼠四肢皮下,连续记录心电图(electrocardiogram, ECG)。自右侧颈动脉插管至左心室,记录血流动力学参数。左侧颈外静脉插管给药。 3.实验共分为10组,成年及老年大鼠各5组(n=8/成年组,n=6/老年组)。①成年大鼠缺血再灌注组( I/Radult)及老年大鼠缺血再灌注组( I/Raged):大鼠造模,缺血前后及再灌注前后不再给予其他干预;②成年大鼠缺血后处理组(IPostadult)及老年大鼠缺血后处理组(IPostaged):大鼠造模,再灌注即刻给予缺血后处理(4×10

Selleck Proteasome 抑制剂 s I/ 10 s R),再无其他干预;③成年大鼠缺血后处理联合LY294002组(IPost+LYadult)及老年大鼠缺血后处理联合LY294002组(IPost+LYaged):LY294002是选择性的PI3K抑制剂,大鼠造模,再灌注即刻给予缺血后处理(4×10 s I/ 10 s R),同时由另一术者经大鼠左侧颈外静脉给药LY294002(0.3 mg/kg),再无其他干预;④成年大鼠药物载体组(Vehicleadult)及老年大鼠药物载体组(Vehicleaged):大鼠造模,再灌注即刻给予缺血后处理,同时给予0.02%的DMSO(与IPost+LY组等容积,而不含有LY294002);⑤成年大鼠假手术组( Shamadult )及老年大鼠假手术组(Shamaged):未造模大鼠,颈部切开,气管插管,开胸,前降支下缝线等过程均同造模组,只是不进行冠脉结扎。 4.在缺血前及再灌注3 h后取血0.5 mL,离心,取血清-70℃保存,用血清肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测酶活性。 5.再灌注结束时,采用Evans blue与TTC染色测量缺血区及梗死区面积。 6.上述10组,各组均额外再做4只大鼠,缺血30 min,在再灌注15 min时,取缺血区组织,采用Western Blotting方法测定缺血心肌组织Akt, GSK-3β蛋白含量及其磷酸化水平。 实验结果 1.血流动力学参数包括心率( {TNF-alpha抑制剂|TNF alpha抑制剂|TNF-alpha抑制剂|TNF alpha抑制剂|TNF-alpha抑制剂|TNF alpha抑制剂|TNF-alpha抑制剂|TNF alpha抑制剂|TNF-alpha抑制剂|TNF alpha抑制剂|TNF-alpha抑制剂|TNF alpha抑制剂|TNF-alpha抑制剂|TNF alpha抑制剂|TNF-alpha抑制剂|TNF alpha抑制剂|TNF-alpha抑制剂|TNF alpha抑制剂|TNF-alpha抑制剂|TNF alpha抑制剂|TNF-alpha抑制剂|TNF alpha抑制剂|TNF-alpha抑制剂|TNF alpha抑制剂|TNF-alpha抑制剂|TNF alpha抑制剂|TNF-alpha抑制剂|TNF alpha抑制剂|TNF-alpha抑制剂| 购买TNF-alpha抑制剂|TNF-alpha抑制剂半抑制浓度|TNF-alpha抑制剂 价格|TNF-alpha抑制剂 花费|TNF-alpha抑制剂溶解度|TNF-alpha抑制剂购买|TNF-alpha抑制剂制造商|TNF-alpha抑制剂研究购买|TNF-alpha抑制剂订单|TNF-alpha抑制剂小白鼠|TNF-alpha抑制剂化学结构|TNF-alpha抑制剂分子量|TNF-alpha抑制剂分子重量|TNF-alpha抑制剂数据表|TNF-alpha抑制剂供应商|TNF-alpha抑制剂体外|TNF-alpha抑制剂细胞系|TNF-alpha抑制剂浓度|TNF-alpha抑制剂核磁共振|TNF-alpha抑制剂体内|TNF-alpha抑制剂临床试验|TNF-alpha抑制剂s|TNF-alpha signaling抑制剂|TNF-alpha pathway抑制剂|TNF-alpha signaling pathway抑制剂|TNF-alpha signaling抑制剂s|TNF alpha pathway抑制剂s|TNF-alpha signaling pathway抑制剂s|TNF-alpha抑制剂 library|TNF-alpha activity inhibition|TNF-alpha activity|TNF-alpha inhibition|TNF-alpha抑制剂s library|TNF alpha抑制剂 libraries|TNF-alpha抑制剂 screening library|TNF-alpha high throughput screening|TNF-alpha抑制剂s high throughput screening|TNF-alpha phosphorylation|TNF-alpha screening|TNF-alpha assay|TNF-alpha animal study| HR )、LVDP以及±dP/dtmax (1)心率:在所有监测的时间点I/Radult,I Postadult及IPost+LYadult组之间; I/Raged,IPostaged及IPost+LYaged组之间没有显著差异。单就I/R组而言,在基线、I 5 min,R 15 min及R 30 min时老年大鼠的心率明显低于成年大鼠组。就IPost及IPost+LY组而言,老年大鼠与成年大鼠心率没有差异。 (2)LVDP:所有监测的时间点I/Radult,IP ostadult及IPost + LYadult组之间; I/Raged,IPostaged及IPost + LYaged组之间没有显著差异。单就I/R组而言,基线、R

5min,R 1h及R 2h时老年大鼠的LVDP明显低于成年大鼠组。就IPost组而言,R 5min和R 2h时老年大鼠的LVDP明显低于成年大鼠组。就IPost+LY组而言,R 2h和R 3h时老年大鼠的LVDP明显低于成年大鼠组。 (3) +dP/dtmax: R 5min,R 2h及R 3h,IPostadult组大鼠+dP/dtmax明显高于I/Radult及IPost+LYadult。但在所有监测的时间I/Raged,IP

ostaged及IPost + LYaged组之间没有显著差异。单就I/R组而言,老年大鼠与成年大鼠之间没有差别。就IPost组而言,整个再灌注期间除了R 和 1h时,老年大鼠的+dP/dtmax明显低于成年大鼠。就IPost+LY组而言,只是在R 30min时老年大鼠的+dP/dtmax明显低于成年大鼠组。 (4) -dP/dtmax: R 2h及R 3h,IPostadult组大鼠-dP/dtmax明显高于I/Radult及IPost+LYadult。但在所有监测的时间I/Raged,IPostaged及IPost+LYaged组之间没有显著差异。在I/R组和IPost+LY组,只有I 5min时,老年大鼠的-dP/dtmax明显高于成年大鼠。但在IPost组,R 5min和R 15min时,老年大鼠的-dP/dtmax都明显低于成年大鼠组。 2.冠脉LAD阻塞后缺血危险区(area at risk , AAR以%LV表示)在除Sham组外的其余各组之间是可比的(I/Radult,52.8±5.2%;IPostadult, 52.0±5.0%;IPost+LYadult ,52.2±5.8%;I/Raged, 51.3±7.2%;IPostaged, 53.8±3.5%;IPost+LYaged,51.1±5.8%;所有P =NS)。正如所期望的,与I/R组相比,IPost明显减小梗死面积(Infarct size,IS;以%AAR表示) (IPostadult vs. I/Radult:11.9±1.6% vs. 30.2±2.8%,P<0.05)。给予PI3K抑制剂LY294002后,CK与LDH水平升高幅度均比IPost组高(所有P
免疫球蛋白超家族(immunoglobulin superfamily,IgSF)成员CD226分子是一种广泛表达于多种免疫细胞膜表面的Ⅰ型跨膜糖蛋白,在2000年第七届国际人类白细胞分化抗原协作组大会上获得新的CD命名。此前,该分子被称为“T细胞谱系特异性活化抗原1(T lineage- specific activation antigen 1,TLiSA1)”、“血小板与T细胞活化抗原1(platelet and T cell activation antigen 1,PTA1)”和“DNAX辅助分子1(DNAX accessory molecule-1,DNAM-1)”。 人CD226基因于1996年克隆成功,位于染色体18q22.

05。Rapamycin组中,神经元中和胶质细胞的自噬的表达在4h、1d、3d、7d和21d逐渐升高,较单纯的脊髓损伤组有所提高,且差异具有统计学意义,P<0.05。Rapamycin组中,Bcl-2的表达在脊髓损伤4h、1d、3d、7d和21d后较单纯的脊髓损伤组有所升高,且差异具有统计学意义,P<0.05。经过Western检测,我们发现单纯的脊髓损伤组各个时间点的BAX的表达较正常对照组均有所下降。3-MA组中,BAX的表达在脊髓损伤4h、1d、3d、7d和21d后较单纯的脊髓损伤组有所上升,且差异具有统计学意义,P<0.05。Rapamycin组中,BAX的表达在脊髓损伤4h、1d、3d、7d和21d后较单纯的脊髓损伤组有所下降,且差异具有统计学意义,P<0.05。结论脊髓损伤后,自噬的抑制能够诱发神经元和胶质细胞的凋亡,自噬的增强能够抑制神经元和胶质细胞的凋亡；自噬的抑制能够抑制Bcl-2的表达,促进BAX的表达,自噬的增强能够促进Bcl-2的表达,抑制BAX的表达。
成人原发性中枢神经系统肿瘤中，包括多种组织学类型的脑神经胶质瘤是最为多见的。而恶性级别最高的要数胶质母细胞瘤，GBM的标准治疗包括早期肿瘤的手术切除、口服烷化剂替莫唑胺（TMZ）化疗及辅助性放疗结合。不过，由于这些肿瘤令人难以置信的耐药和肿瘤频繁复发，胶质母细胞瘤对外科手术治疗、放化疗极其耐受，GBM的中位生存时间仅限于诊断后约15个月。除了肿瘤细胞自身对放疗、化疗的抵制，肿瘤与内环境之间的相互作用还通过参与肿瘤的抗血管生成、组织缺氧和免疫抑制。化疗药物在恶性胶质瘤的治疗中发挥重要作用。新一代烷化剂替莫唑胺是目前对恶性胶质瘤的标准化疗药物，并已被证明有着良好的临床治疗效果。替莫唑胺是经过O6-G甲基化诱导的引发DNA损伤激活的错配修复机制，然而，由于化疗药物内在性和获得性耐药现象还有血脑屏障的存在，很大程度上影响了化疗效果。

点击此处 AKT作为PI3K/AKT传导途径中的关键因子，在促成肿瘤细胞生长增殖、血管的生成、增加侵袭转移的发生、抑制肿瘤的凋亡和抵制放化疗中起着非常关键的作用。大量文献报导AKT在肿瘤的发生发展及转移中扮演了重要角色，更深入的研究AKT作用的分子生物学机理并发现其与恶性癌症的相关性，有可能为癌症的基因治疗、抗肿瘤药物的开发研究提供新的思路和作用靶点。我科前期实验通过GBM基因芯片研究发现了29条基因和替莫唑胺化疗耐药相关且影响患者生存期，AKT2基因就是其中一个。近年来，一些实验研究已经表明PI3K/AKT信号传导途径与癌症化疗疗效关系比较密切。AKT活化还可能参与肿瘤放射治疗的抵抗，研究结果表明AKT2似乎是一个有效的克服胶质瘤治疗抵抗重要靶标。根据既往实验结果我们初步推测沉默AKT2基因表达可能成为临床上增加胶质瘤化疗敏感性的一种可行性的方法。本实验将分四部分研究AKT2基因沉默在胶质母细胞瘤中对替莫唑胺化疗疗效的改变及其作用机理。第一部分，RNA沉默AKT2的表达对胶质瘤U251细胞株替莫唑胺疗效的影响；第二部分，RNA沉默AKT2的表达对胶质瘤裸鼠移植瘤的替莫唑胺疗效的影响；第三部分，胶质瘤替莫唑胺化疗耐药细胞株的建立及其特性鉴定；第四部分，AKT2在胶质瘤细胞中替莫唑胺化疗抵制的作用机理研究。通过以上实验阐明AKT2基因在脑胶质瘤莫唑胺化疗耐药中的分子生物学机制，在分子水平上寻找和莫唑胺化疗耐药相关的关键基因及其作用机制，提高临床上脑胶质瘤患者对替莫唑胺的化疗敏感性。 Ion Channel Ligand Library 第一部分RNA干扰AKT2的表达对胶质瘤U251细胞株替莫唑胺敏感性的影响目的：研究胶质母细胞瘤U251细胞中AKT2基因沉默对替莫唑胺化疗效果的改变。方法：AKT2基因慢病毒载体的构建，然后在体外条件下将AKT2特异性shRNA表达载体AKT2-shRNA转染至U251细胞株中。蛋白印迹、Real-time

PCR实验方法测定转染shRNA后U251细胞中AKT2基因表达水平的变化，应用CCK8法检测RNA干扰AKT2后U251细胞对替莫唑胺敏感性的变化情况。 结果：转染AKT2-shRNA后U251细胞AKT2基因表达程度较U251未转染组和U251转染阴性慢病毒组都显著下降；替莫唑胺对U251细胞的半数细胞抑制浓度（IC50）从U251空白对照组的(39.72±2.41)μg/ml、阴性对照组的(39.43±2.24)μg/ml降到(27.23±1.93)μg/ml，AKT2干扰组U251细胞对TMZ药物的疗效变化有显著性差异（P＜0.05）。 查找更多 结论：AKT2-shRNA能够抑制胶质母细胞瘤细胞株U251中AKT2表达，并能增加对替莫唑胺的敏感性。 第二部分RNA干扰AKT2表达对胶质瘤裸鼠移植瘤替莫唑胺敏感性的影响 目的：研究RNA沉默AKT2对脑胶质瘤移植瘤的替莫唑胺疗效的改变。 方法：首先，构建胶质瘤裸鼠成瘤模型，瘤内注射和腹腔内给TMZ药物，以替莫唑胺化疗药物和AKT2-shRNA表达载体对成瘤后的裸鼠瘤体进行联合干预治疗，进而观察并测量各组裸鼠肿瘤体积大小。Real-time PCR及免疫组化实验分别测定各组裸鼠肿瘤细胞的AKT2的表达程度， TUNEL实验测定并计算分析各组裸鼠成瘤后肿瘤组织细胞的凋亡的变化。 结果：空白对照组、替莫唑胺化疗组、TMZ+阴性对照组、TMZ+AKT2干扰组裸鼠瘤体体积分别为：(669.34±98.73) mm3、(399.86±55.26) mm3、(383.81±34.01) mm3、(297.72±41.49) mm3；瘤体质量分别为：(1.25±0.26)g、(0.72±0.11)g、(0.69±0.07)g、(0.52±0.07)g。TMZ+AKT2干扰组其肿瘤体积及瘤体质量都明显小于空白对照组、替莫唑胺组和TMZ+阴性对照组，有显著性差异（P＜0.05）。免疫组化和Real-time PCR实验表明TMZ+AKT2干扰组比其他对照组AKT2表达程度显著降低（P＜0.

1(+),Lipofectamine~(TM) 2000,G418,CD24(C-20)、Raf-1(C-12)、p-Raf-1(Ser338)、p-ERK(E-4)、ERK1/2(137F5)、p38

MAPK、phospho-p38 MAPK、SAPK/JNK、phospho-SAPK/JNK(Thr183/Tyr185)等抗体,MEK1/2抑制剂U0126,p38 MAPK抑制剂SB203580,106例大肠癌及癌旁正常黏膜的石蜡包埋组织标本。 2、主要方法 2.1构建CD24表达质粒 从GeneBank查询完整的人CD24 cDNA序列(no.NM_013230),按照cDNA设计引物,上游引物5′-ta-ggtacc AG-014699订单 act atgggcagagcaatgg包含了酶切位点EcoRI,下游引物5′-ccg gaattc cg ttaagagtagagatg包含了酶切位点KpnI,目的片段长度为265bp。以人正常肠组织cDNA文库为模板,PCR扩增CD24目的片段,按赛百盛“easy-do”PCR体系的说明加样,反应条件为94℃预变性5min,然后进入以下36个循环:94℃变性30s,54℃退火30s,72℃延伸1min;循环完毕,72℃延伸10min。PCR产物和原始质粒纯化,EcoRI和KpnI 一般 37℃双酶切,酶切产物纯化后进行连接反应,连接产物转化入感受态细胞,挑取菌落扩增、鉴定。 2.2 RT-PCR检测CD24 mRNA水平 按Invitrogen的Trizol的说明书提取细胞总mRNA,使用Fermentas的逆转录试剂盒,按说明书将mRNA逆转录为cDNA,PCR扩增CD24目的片段,按赛百盛“easy-do”PCR体系加样,反应条件同上,退火温度为56℃,1.2%琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物。 2.3流式细胞术检测CD24蛋白表达水平 制备浓度为5×10~6/ml的细胞悬液,5%正常兔血清封闭,按1:100加入CD24单克隆抗体,冰上孵育60min,洗涤;按1:200加入兔抗小鼠的FITC标记的二抗,冰上孵育40min,洗涤,重悬,上机检测。 2.4重组质粒转染SW480细胞并建立稳定表达CD24的细胞克隆株 六孔板中细胞生长至70%左右融合时,按Invitrogen公司Lipofectamine2000~(TM)产品说明书将质粒导入SW480细胞,转染48h后改用含600μg/ml G418、10%FBS的1640培养基连续筛选,挑取单克隆后继续扩大培养,用KF-PCR和流式细胞术鉴定目的基因(CD24)的表达。

2.5 Western blotting 提取细胞总蛋白,BCA法测定蛋白浓度,按《分子克隆》第三版的配方配制10%蛋白电泳分离胶和5%积层胶,蛋白变性上样,上样量30μg,恒压100V电泳约3h,2mA/cm~2,60min恒流半干电转膜,5%的脱脂奶粉/TBS-T室温封闭1h,5%的脱脂奶粉/TBS-T 还有 1:500稀释相应的一抗,与PVDF膜4℃孵育过夜,TBS-T洗涤,同样方法1:5000稀释HRP标记二抗,室温1h,TBS-T洗涤后,ECL化学发光法检测,Quantity one(Bio-Rad)软件半定量分析。 2.6 CCK-8法检测细胞增殖 接种处理好的单细胞悬液于96孔板,每孔100μl含2000(增殖实验)或3000(增殖抑制实验)个细胞的RPMI-1640完全培养基,每组设6个复孔,不同处理时间后,加入CCK-8溶液10μl,继续培养2h后在450nm波长下,酶联免疫分析仪测定各孔光吸收值,记录结果,以时间为横轴,光吸收值为纵轴绘制细胞生长曲线,数据以mean±SD表示。

2.7免疫组织化学(SABC法)检测CD24、p-ERK1/2和p-p38 MAPK在大肠癌组织中的表达情况 大肠癌组织标本的连续切片(4μm)进行脱蜡水化,0.01M枸橼酸钠缓冲溶液(pH 6.0)微波抗原修复10min,3%过氧化氢灭活内源性过氧化物酶20min,正常山羊或兔血清封闭30min,抗体稀释液稀释后的一抗(约50μl),4℃过夜,1×PBS-T冲洗,生物素化二抗与一抗孵育室温15min,HRP偶联的亲和素(SABC试剂)和生物素化的二抗室温孵育10min,DAB显色1min,苏木素复染细胞核,盐酸酒精分化,梯度酒精脱水、二甲苯透明、中性树脂封片、镜检。所有结果由两个病理科高级医师独立阅片评分。 2.8统计学分析 结果均经SPSS 13.0软件统计分析。流式细胞术实验结果取三次结果的平均值,Western blotting和RT-PCR进行灰度扫描后将实验组换算成对照组的相对百分数进行统计,比较采用方差分析(one-way ANOVA),多重比较采用LSD法;增殖实验和增殖抑制实验的结果取三次实验结果中的一次作为统计结果,比较采用析因设计的方差分析;免疫组化各分子染色强度(等级资料)与性别、年龄和肿瘤部位之间的关系分析采用非参数秩和检验,而表达强度与Duke’s分期和肿瘤分级之间的关系分析采用Spearman秩相关检验;免疫组化染色的两分子之间的相关性采用Spearman秩相关检验;所有的统计结果以P＜0.

3 1±40 0 .93 ) ng/L( P0 .0 5)。MODS组中死亡患者的血清L TB4含量为( 4 44 .98±2 0 6.3 0 ) ng/L,明显低于存活患者的( 1 3 3 4 .51±53 0 .3 5) ng/L( P
慢性肝病的重要病理基础是肝纤维化,慢性肝病通过纤维化的发展走向肝硬化.近年来丝裂原激活蛋白激酶(Mitogenactivatedproteinkinase,MAPK)通路是激活后向核内转移,作用于核内转录因子的一个蛋白激酶家族.MAPKKK对MAPKK的丝氨酸、苏氨酸双位点磷酸化而将其活化;进而MAPKK对MAPK进行苏氨酸、丝氨酸双位点磷酸化活化,活化后的蛋白激酶转移至核内激活相应的基因受体,进而促进相应基因的表达.
糖尿病状态下,多种因素激活丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路。MAPK激活后,使肾脏细胞肥大,细胞外基质积聚,最终导致肾小球硬化和肾小管间质纤维化。应用MAPK阻断剂可以有效对抗上述作用,为临床上有效治疗糖尿病肾病提供一条新的思路。
Oligodeoxynucleotide

containing unmethylated cytosine phosphate-guanosine Cell Cycle抑制剂 motif(CpG ODN) may induce high expression of CD80, CD86, CD83, HLA I and HLAⅡ molecules on dendritic cells(DC) and stimulate DC to produce high level of IL-6, IL-12, TNF-α and IFN-α. CpG ODN is demonstrated in vivo to be a very potent adjuvant for Th1 cells, regulating Th0 cells to develop toward Th1 cells. Its role for DC is characteristics of CpG ODN sequence specificity and species specificity. CpG ODN is, at present, considered as a pathogen associated molecular pattern which binds its specific receptor,Toll-like receptor 9,then functions through TLR/IL-1R signaling pathway. It may represent a new therapeutic drug for broad applications in infectious disease, autoimmune disease, allergy and cancer therapy.
Myocardial hypertrophy is an independent risk factor for cardiac events. Mitogen-activated protein kinases (MAPK), including extracellular signal-regulated kinases, C-jun N-terminal kinases and P38-MAPK, are the common

intracellular pathway of transducing hypertrophic signs.

All three MAPK subfamilies selleck公司 play an important role in development of myocardial hypertrophy.

目的研究半边旗二萜类化合物5F(11α-羟基-15-氧-16-烯-对映贝克杉烷-19酸)对人高转移卵巢癌细胞系HO-8910PM细胞内核转录因子κBP65亚基[NF-κB(P65)]、Smad3蛋白及NF-κB(P65)、ETS-1mRNA表达的影响,探讨其抗肿瘤的作用机制。方法MTT法检测5F对HO-8910PM细胞增殖的影响;Westernblot分析NF-κB(P65)及Smad3蛋白的表达;RT-PCR分析NF-κB(P65)及ETS-1mRNA的表达。结果5F能抑制HO-8910PM细胞的增殖,抑制率随剂量的增加而增加,具有剂量依赖性;25～100μmol/L5F作用HO-8910PM细胞24h后,NF-κB(P65)、Smad3蛋白表达水平明显下降,并呈剂量效应关系;5F明显下调NF-κB(P65)mRNA的表达,轻微下调ETS-1mRNA的表达。结论5F抗肿瘤活性与NF-κB(P65)、Smad3蛋白和NF-κB(P65)、ETS-1mRNA的表达有关。

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路是调节细胞增殖和凋亡的重要通路。最近研究发现,MAPK信号转导通路可能参与肿瘤化疗耐药,其作用机制可能是调控耐药相关基因的表达,通过对该通路的干预可以提高肿瘤的化疗敏感性,从而逆转化疗耐药。

凋亡对维持机体内环境的稳定具有重要的负调节机制,越来越多的证据表明凋亡对维持月经周期中细胞内环境的稳定具有重要的作用。子宫内膜异位症(EMs)的在位及异位内膜和正常内膜相比有功能上的不同,这些不同将导致逆流的子宫内膜细胞成活并形成EMs,其中凋亡受到越来越多的重视。就凋亡在正常子宫内膜的生理功能和在EMs在位、异位内膜调节的改变,凋亡在EMs恶变中的作用及凋亡与EMs的治疗作一综述。
丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)是信号从细胞表面转导到细胞内部的重要传递者,参与细胞生长、增殖、分化、凋亡和细胞间功能的同步等多种生理学过程。脑缺血早期MAPK可被激活,在缺血区胶质细胞和神经元表达增加,并呈现为时间相关性,提示MAPK信号通路在脑缺血神经元凋亡过程中起重要的调控作用,在信号通路水平阻断和调控MAPK表达和活性有望成为治疗缺血性卒中的一条新的途径。
AIM: 所以 To evaluate the role of intestinal endotoxemia in the genesis of hepatopulmonary syndrome. METHODS: A rat model of cirrhosis was prepared with the method of compound factors. At the end of the eighth week, rats with cirrhosis were treated with 300 μg LPS/100 g body weight, and 1 g/rat of glycine about four h prior to LPS. After three h of LPS treatment, blood and tissues were collected for various measurements.

347%、0.784%、42.973%、73.448%及58.591%。3.rt-pcr扩增结果:shh、ptch1、smo、gli1mrna在胰腺癌组织中表达较胰腺癌旁组织表达明显增多(p0.05)。临床病理特征的关系:中低分化胰腺癌组织shh、ptch1、smo、gli1mrna平均表达水平均高于高分化胰腺癌组织平均表达水平,差异具有统计学意义(p<0.05)。westernblot实验结果:分别检测shh、ptch1、smo、gli1蛋白在胰腺癌组织中表达较胰腺癌旁组织表达均明显增多(p0.05)。临床病理特征的关系:中低分化胰腺癌组织shh、ptch1、smo、gli1蛋白平均表达水平均高于高分化胰腺癌组织shh、ptch1、smo、gli1蛋白平均表达水平,差异具有统计学意义(p<0.05);中低分化胰腺癌组织shh、ptch1、smo、gli1蛋白平均表达水平均高于高分化胰腺癌组织ptch1蛋白平均表达水平,差异具有统计学意义(p0.05)。预后因素的分析:单因素分析:22纳入个因素中,性别、分期、淋巴结转移、术后化疗、术后胰瘘发生及smo基因的高表达6个为显著性因素(p<0.05),将上述6个因素代入cox回归方程,结果示:分期、术后化疗和术后胰瘘的发生为影响术后患者预后的独立因素(p<0.05),其中分期、术后胰瘘的标准回归系数为正值,表明其与患者术后死亡呈正相关,而术后化疗为负值,说明其为胰腺癌患者术后预后的保护因素。结论:1.胰腺癌中的确存在sp细胞,其表型为cd133十和cd44+cd24-esa+,具有肿瘤干细胞的生物学特性。2.针对hh信号通路关键基因smo设计了3条sirna片段,成功构建了携带这3条片段的慢病毒表达载体,通过转染sw1990细胞后对smo表达的抑制率筛选出最为适于后续研究的smosirna慢病毒表达载体,这不仅为本研究后续研究的顺利开展奠定了良好的实验基础,也为针对hh信号通路靶向干扰的基因治疗研究提供了一定实验证据。3.shh、ptch1、smo、gli1mrna在胰腺癌组织中表达较胰腺癌旁组织表达明显增多,而且在低分化胰腺癌组织平均表达水平高于高分化胰腺癌组织平均表达水平;与患者年龄、肿瘤直径、tnm分期、侵犯血管和神经、淋巴结转移无关。shh、ptch1、smo、gli1蛋白在胰腺癌组织中表达较胰腺癌旁组织表达明显增多,以上四个蛋白在低分化胰腺癌组织中平均表达水平高于高分化胰腺癌组织平均表达水平;胰腺癌组织中蛋白表达与胰腺癌的分化程度显著有关,与患者年龄、肿瘤直径、tnm分期、侵犯血管和神经、淋巴结转移无关。影响胰腺癌预后的因素中分期、术后胰瘘与患者术后死亡呈正相关,而术后化疗为胰腺癌患者术后预后的保护因素。
目的：对伊马替尼（格列卫）治疗慢性粒细胞白血病的疗效及生存分析。方法：66例CML患者口服伊马替尼治疗后，定期检测血常规、染色体核型、bcr-abl融合基因，评估其疗效、总生存（OS）率和疾病无进展（PFS）情况。结果：中位伊马替尼治疗时间为26.5（6-112）个月。1.慢性期患者累积所获得的完全血液学缓解率（CHR）、主要细胞遗传学缓解率（MCyR）、完全细胞遗传学缓解率（CCyR）和主要分子学缓解率（MM0R）分别是94.5%、87.3%、78.2%和69.1%。与加速期及急变期患者评估结果比较，差异有统计（P＜0.05）。慢性期患者中，低危组与高危组之间累积达到的MM0R差异存在统计学意义（P=0.047）。2.慢性期的患者1年、2年和4年总的OS率分别是（97.7±1.1）%、（96.2±3.8）%、（90.1±6.8）%，疾病无进展（PFS）率分别是（95.3±3.3）%、（83.0±6.5）%、（76.6±8.6）%。加速期和急变期患者在6个月、1年、15个月的OS率为（91.7±8）%、（75±2.5）%、（66.7±3.6）%。1年和2年的PFS率是（75.0±15.3）%、（60±18.2）%。慢性期的患者达CCyR、MM0R较之加速期和急变期患者之间的差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：伊马替尼（格列卫）治疗慢性粒细胞白血病慢性期患者可获得较高的遗传学缓解和分子学缓解，明显延长生存时间，但是对加速期和急变期疗效则不理想，伊马替尼耐药仍是现在临床治疗中面临的主要问题。
有关宫颈癌是否存在Hedgehog信号通路及EMT(epithelial

Nintedanib分子量 通常 mesenchymal transition上皮间质转化)相关因子的异常表达以及对宫颈癌的发生,侵润及转移的影响,目前相关报道甚少。本研究通过以不同浓度非甾体生物碱cyclopaine阻断Hedgehog言号通路,观察宫颈癌Hela细胞中Hedgehog信号通路关键因子Gli-1和EMT相关因子Slug表达受抑制后,宫颈癌细胞生物学行为的改变,探索其作为宫颈癌Hedgehog-EMT信号通路治疗新靶点的可能性。

目的： 宫颈癌Hela细胞中观察Hedgehog信号传导通路关键因子Gli-1及EMT相关因子Slug的表达,探索Hedgehog信号传导通路和EMT相关因子对宫颈癌Hela细胞生物学行为的影响。 selleck screening library 方法： 1. MTT法和软琼脂克隆形成实验,检测宫颈癌Hela细胞的细胞体外增殖能力和细胞集落形成能力。 2. RT-PCR的方法检测宫颈癌Hela细胞中Gli-1和Slug基因mRNA的表达。3. Western-Blot方法检测宫颈癌Hela细胞Gli-1和Slug蛋白的表达。 结果： 1.MTT和软琼脂克隆形成实验结果显示,随着Hedgehog信号传导通路抑制剂cyclopamine药物浓度的增加,细胞增殖率及细胞集落的形成能力下降,具有显著差异(p
目的结合上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)与肿瘤干细胞(cancer stem cells, CSCs)学说,初步研究EMT是否能使涎腺腺样囊性癌细胞的干细胞相关标记的表达产生变化,并讨论其意义。 方法(1) TGF-β1诱导培养ACC-M细胞发生EMT的形态学动态观察：体外培养涎腺腺样囊性癌肺高转移细胞株ACC-M,经TGF-β1诱导后连续观察其细胞形态的变化；(2)TGF-β1诱导培养后ACC-M细胞EMT及CSCs相关标记物表达的变化：实验分两组,实验组ACC-M细胞培养时加入TGF-β1使其浓度达到10g/ml,对照组加入等量PBS液；流式细胞术检测培养0h、24h、48h后ACC-M细胞的EMT相关标记物E-cad、N-cad、vimentin,以及肿瘤干细胞相关标记物0ct-4的表达情况；实验结果经SPSS11.0软件统计,采用重复测量数据方差分析中的广义线性模型(General Linear Model,GLM)进行数据分析。 结果 1.

6mmol/L葡萄糖和24.4mmol/L甘露醇的DMEM/F12培养液。各组培养48h用MTT法检测各组视网膜色素上皮细胞的增生活力,用CM-H2DCFDA荧光染色检测RPE细胞中ROS的产生量。结果:与对照组相比,高糖培养人视网膜色素上皮细胞48h可以导致RPE细胞的损伤,抑制RPE细胞增殖,并使ROS生成增加,在一定程度上,与p38-MAPK途径的激活有关。结论:高糖培养ARPE-19可致细胞损伤,抑制增殖,并使ROS生成增加。
The tissue destruction characteristic of syphilis infection may be caused by inflammation due to Treponema pallidum and the ensuing immune responses to the pathogen.T.pallidum selleck screening library membrane proteins are thought to be potent inducers

of inflammation during the early stages of infection.However,the actual membrane proteins that induce inflammatory cytokine production are not known,nor are the molecular mechanisms responsible for triggering and sustaining the inflammatory cascades.In the present study,Tp0751 recombinant protein from T.pallidum was found to induce the production of proinflammatory cytokines,including TNF-α,IL-1βand

IL-6,in a THP-1 human monocyte cell line.The signal transduction pathways involved in the production of these cytokines were 并且 then further investigated.No inhibition of TNF-a,IL-1β,or IL-6 production was observed following treatment with the SAPK/JNK specific inhibitor SP600125 or with an 还有 ERK inhibitor PD98059.By contrast,anti-TLR2 mAb,anti-CD14 mAb,and the p38 inhibitor SB203580 significantly inhibited the production of all three cytokines.In addition,pyrrolidine dithiocarbamate (PDTC),a specific inhibitor of NF-κB,profoundly inhibited the production of these cytokines.Tp0751

treatment strongly activated NF-κB,as revealed by Western blotting.However,NF-κB translocation was significantly inhibited by treatment with PDTC.These results indicated that TLR2,CD14,MAPKs/p38,and NF-κB might be implicated in the inflammatory reaction caused by T.pallidum infection.
目的:研究脂多糖(LPS)对肥大细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB1)释放的诱导作用及其胞内信号通路。方法:采用小鼠肥大细胞株P815,观察不同剂量LPS诱导后细胞培养上清液中HMGB1含量和细胞HMGB1mRNA表达水平的变化,及不同剂量丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路抑制剂(SB203580、SB202190、U0126和PD98059)对LPS诱导后HMGB1胞外释放的影响。HMGB1含量采用酶联免疫吸附试验检测。结果:LPS诱导后细胞培养上清液中HMGB1含量明显升高,并与LPS剂量、诱导时间有关;100μg/LLPS分别诱导8、24、48h后,HMGB1mRNA表达水平明显增强(P<0.01);SB203580和SB202190对LPS诱导HMGB1释放有明显的抑制作用(P<0.

明确RSG对颅骨成骨细胞分化的影响极其机制。2.明确明确RSG对颅骨成骨细胞增殖的影响及其机制； 本论文的第二个部分在成骨样细胞MG-63上进行。雌激素对于绝经后骨质疏松的治疗，效果显著。但同时又存在易诱发乳腺癌、子宫内膜癌等潜在危险因素。近年来，植物雌激素作为一种天然的选择性雌激素受体调节剂（SERM），在骨质疏松的防治中日益受到关注。大豆异黄酮是其中最具代表性的一类。大豆异黄酮(soybeanisoflavone)，属植物黄酮类，主要来源于豆科蝶形花亚科植物，是一类具有广泛营养学价值，健康保护和治疗学意义的非固醇类物质。大豆异黄酮的结构与雌激素相似，能够与雌激素受体(ERs)结合，进而发挥转录调节的作用。ER分为α和β两种亚型，雌激素与ER结合后，除了通过经典的ERE途径调节基因转录外；也有大量的文献报道，雌激素还可以通过蛋白-蛋白间的相互作用，调节CRE介导的基因转录。异黄酮类植物雌激素是否也能像雌激素一样，对ERE和CRE介导的基因转录都具有调节作用呢？有关这方面的报道，结论不一。因此，我们在MG63细胞上，主要进行了两方面的研究：1.比较大豆异黄酮与雌激素在雌激素经典作用途径中的作用异同，即两者对ERE报告基因的转录调节作用有何差别；2.比较大豆异黄酮与雌激素在雌激素非经典作用途径中的作用异同，即两者对CRE报告基因的转录调节作用有何差别。

EPZ-6438制造商 主要实验结果如下： 一、罗格列酮对颅骨成骨细胞增殖及分化的调节作用 （一） RSG抑制颅骨成骨细胞分化的作用及其机制 1、在原代培养的小鼠颅骨细胞上，利用β-磷酸甘油和L-抗坏血酸共同诱导其成骨细胞的成熟，给予不同浓度的RSG（10-9～10-6M）连续处理10天。RSG能剂量依赖性的抑制碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、1型胶原蛋白（type1collagen，Col1）、Runt相关转录因子2（Runt-related transcription factor2，Runx2）、骨钙素（osteocalcin，OC）等成骨相关基因的mRNA表达。 2、在诱导条件培养基培养，并给予不同浓度的RSG（10-9～10-6M）连续处理21天，利用茜素红染色以及碱性磷酸酶活性检测，观察RSG对骨钙结节形成的影响。结果显示，RSG能显著抑制钙结节的形成，抑制碱性磷酸酶的活性，其抑制效应呈现剂量依赖性。

3、 Wnt/β-catenin通路已知在促进成骨细胞分化成熟过程中发挥主要作用。作为调节Wnt信号通道中最关键的事件之一，β-catenin在胞内的水平可受到GSK-3β的调节。当GSK3β被激活能促进β-catenin的降解，降低其在胞内的表达水平，从而抑制骨形成。为明确RSG抑制成骨细胞的分化是否是通过激活GSK3β实现的。我们选取GSK3β的特异性阻断剂SB216763（2*10-5M）与RSG（10-6M）共同处理成骨细胞。SB216763能完全逆转RSG抑制Col1，ALP，Runx2，OC等成骨相关基因的mRNA表达。 4、用SB216763（2*10-5M）与RSG（10-6M）共同处理成骨细胞21天，SB216763能完全逆转RSG对制钙结节形成以及碱性磷酸酶活性的抑制作用。以上结果提示，RSG抑制成骨细胞的分化是通过激活GSK3β实现的。

5、为进一步探讨RSG作用的受体机制，我们联合使用PPARγ特异性阻断剂GW9662（10-6M）与RSG（10-6M），分别观察成骨相关基因，骨钙形成以及碱性磷酸酶活性的变化，以明确RSG抑制成骨细胞的分化是否通过PPARγ。结果显示，GW9662只能部分逆转RSG对上述观察项目的抑制效应。进一步利用siRNA干扰技术，敲低细胞内的PPARγ，所得结果与使用GW9662的作用一致。以上结果提示RSG激活GSK3β的作用仅部分通过PPARγ实现。 Palbociclib 花费 6、有文献报道，RSG在骨细胞上可以不依赖于PPARγ，而是通过膜受体GPR40发挥作用。为明确在成骨细胞上，RSG是否也存在同样的作用机制，我们使用GPR40的激动剂GW9508（10-5M）单独处理细胞，未观察到其对成骨基因mRNA表达的影响。接着，又利用siRNA技术敲低细胞内的GPR40，再用RSG（10-6M）处理，分别观察成骨基因的表达，骨钙形成以及碱性磷酸酶活性等指标。结果显示，敲低GPR40后，也只能部分逆转RSG对上述指标的抑制作用。同时，我们还观察了RSG对PPARγ以及GPR40蛋白表达的影响。结果显示，在不给诱导条件时，细胞内PPARγ处于极低的水平，而GPR40水平较高。给予诱导条件后，PPARγ表达增多，而GPR40的表达显著降低。在RSG处理后，PPARγ和GPR40都剂量依赖的表达增多。提示GPR40在成骨诱导过程中维持低表达，RSG可促进GPR40表达，后者由此介导了部分RSG作用。 因为 7、我们还观察了诱导成骨细胞成熟过程中，SHP-1的mRNA和蛋白表达的变化。发现随诱导时程的延长，SHP-1mRNA和蛋白表达呈现时间依赖性增加。给予不同浓度的SHP-1的特异性拮抗剂NSC87877处理。NSC87877对上述成骨基因mRNA的表达以及β-catenin的蛋白表达均有显著的抑制作用，并呈剂量依赖性。进一步，利用siRNA技术敲低细胞内的SHP-1或是过表达无催化活性的SHP-1突变质粒，均能显著抑制成骨基因的表达。提示SHP-1具有促进成骨细胞成熟的作用。 8、给予GSK3β特异性阻断剂SB216763与NSC87877共同作用，SB216763能逆转NSC87877抑制β-catenin蛋白表达的作用，提示，SHP-1促进成骨的作用是通过抑制GSK3β的激活实现的。 9、给予RSG处理，成骨细胞中SHP-1的mRNA表达显著下降，提示RSG抑制成骨细胞中SHP-1的mRNA表达。 （二） RSG抑制颅骨成骨细胞增殖的作用及其机制 1.