然而,APL患者在大量使用ATRA时会出现全反式维甲酸耐药、复发等现象,同时还会产生不同程度的不良反应。此外,ATRA除了对APL患者有较好的疗效,对于AML的其他亚型,都没有显著的治疗效果。因此,寻找更为高效低毒的诱导分化药物或采用药物联合方案完善维甲酸诱导分化治疗策确认细节略是解决上述问题的关键途径。人表皮生长因子受体2(HER2)是ErbB家族中的重要成员,参与细胞生长,增殖,粘附和分化等重要生命过程的调控。有文献报道,抑制HER2的信号通路对白血病可能有潜在的治疗作用。TAK165 (Mubritinib)是所以一种HER2的特异抑制剂,其应用于肿瘤的治疗目前仍处于临床研究阶段。有文献报道,TAK165可以通过介导细胞凋亡,进而针对包括AML在内的多种肿瘤细胞发挥抗肿瘤作用。但是,关于TAK165调控ATRA介导的AML细胞分化目前尚没有文献报道。因此selleck,本课题拟通过实验研究HER2抑制剂TAK165 (Mubritinib)与ATRA联合应用,诱导AML细胞的分化效应,并进一步探讨其内在的分子机制。研究方法：选用人白血病细胞株HL60和NB4为主要研究对象,考察TAK165对于AML细胞的增殖以及周期分布的影响,并检测TAK165与ATRA合用对于AML细胞的诱导分化作用。

采用PI单染结合流式细胞术检测细胞凋亡比例,发现AZD1152通过序贯给药显著增强了顺铂诱导的OVCAR-8细胞凋亡,凋亡比例从两药单用的19.17%和27.86%增加至合用后的71.34%。但是当两药同时作用于OVCAR-8细胞时,则无协同效果。随后,采用Western blot检测凋亡相selleck抑制剂关蛋白PARP、Caspase 3、Caspase 8、CleavedCaspase 3的表达水平,进一步证实了以上结论。(3)通过SRB法检测了AZD1152与顺铂的序贯合用在以顺铂作为一线化疗药的不同肿瘤细胞株中的合用效果。通过计算CI值可知,两药的序贯合用在骨A-1210477制造商肉瘤细胞株KHOS和U20S、非小细胞肺癌细胞株NCI-H1299、膀胱癌细胞株5637、前列腺癌细胞株PC3中表现出较良好的合用效果,但在乳腺癌细胞株MDA-MB-468和非小细胞肺癌细胞株H460中无协同效果。进一步研究发现,原癌基因c-Myc在合用效果良好的细所以胞株中呈现不同程度的高表达,而在无合用效果的细胞株中几乎不表达。以上结果提示,c-Myc的表达水平可能与细胞对AZD1152与顺铂序贯合用的敏感性相关。(4)采用SiRNA技术敲低OVCAR-8细胞中的c-Myc表达量,或采用慢病毒转染技术在SKOV3细胞中过表达c-Myc,通过SRB法检测AZD1152与顺铂在上述各卵巢癌细胞株中的序贯合用效果。

但是在伴有BRAFV600E突变的甲状腺癌中钠碘同向转运体NIS表达水平降低或者膜蛋白定位不好引起功能丧失。因此很多患者失去了使用放射碘治疗的机会，患者的甲状腺癌复发风险增大。钠碘同向转运体NIS在伴有BRAFV600E突变的甲状腺癌中表达水平降低的机制直不是很清楚。 组蛋白乙酰化是组蛋白翻译后修饰的种，调节染色质重构。组蛋白乙酰化可以使染色质解聚，转录因子更容易selleck化学结合在DNA上，促进转录，激活基因表达；相反，组蛋白去乙酰化后染色质结构紧缩，转录因子不容易结合在DNA上，转录抑制，基因沉默。组蛋白乙酰化主要发生在组蛋白H3、H4的N末端比较保守的赖氨酸残基上，H3N末端的乙酰化位点Lys4， Lys9， Lys14， Lys18和Lys23；H4的乙酰化位点主要发生在Lys5，Lys8，Lys12和这个Lys16。根据不同的乙酰化位点在肿瘤中的作用如：前列腺癌组织中组蛋白H3lys9乙酰化水平降低，促进肿瘤的发展，在胃癌、卵巢上皮癌中其降低导致患者预后不好；H3lys14乙酰化水平在肿瘤细胞中水平降低，可能是导致治疗耐药的原因；在低分化前列腺癌病人中H3K18低乙酰化水平和肿瘤高复发率相关，提示组蛋白的乙酰化修饰可能和药物抵抗有关；组蛋并且白H4lys16乙酰化水平降低与多种肿瘤细胞耐药相关，而且在多种肿瘤组织及细胞中明显减少[1]。 甲状腺癌中BRAFV600E突变可以下调NIS基因表达，组蛋白乙酰化水平降低下调钠碘同向转运体NIS表达水平，但是BRAFV600E突变是否通过调节组蛋白乙酰化水平影响钠碘同向转运体NIS基因表达以及可能的机制还不清楚。 我们的课题主要是探讨BRAFV600E突变的甲状腺癌中组蛋白乙酰化对钠碘同向转运体NIS表达的影响。

研究方法：采用两阶段病例-对照研究系统地分析ATP依赖的染色质重构复合物SWI/SNF基因的遗传变异与中国人群胰腺癌发生风险关系。第一阶段在武汉地区中应用中通量基因分型平台OpenArray对SWI/SNF复合物关键基因的标签SNP(tag SNP)与胰腺癌发生关系进行关联研究,筛选出关联SNPs;第二阶段在北京地区用Taqman基因分型技术验证第一阶获悉更多段的关联SNPs。应用卡方检验比较基因型及人口学资料分布；利用Armtage’s趋势检验进行基因型与胰腺癌发生风险的关联分析：应用logistic回归进行单位点分析计算各SNP的效应值;为控制因多重检验而引入的假阳性率,采用错误发现率(False discovery rate,FDR)方法进行多重假设检验校正；应用lOgist可能ic回归对基因-基因和基因-环境交互作用进行分析。 研究结果：1.第一阶段纳入310例胰腺癌病例与457位健康对照,共分析了编码SWI/SNF复合物的6个关键基因上的14个SNP,以隐性遗传模型计算,我们发现位于BRD7基因上的rs11644043(OR=2.04,95%CI=1.17-3.56)、 SMARCA4基因上的rsSelleck GSK112021211085754(OR=1.64,95%CI=1.16-2.33)以及SMARCBl基因上的rs2073389(OR=1.93,95%CI=1.36-2.74)三个位点与胰腺癌发生风险显著相关：第二阶段纳入了429例胰腺癌病例与585位健康对照,成功验证了rs11644043(OR=1.97,95%CI=1.24-3.14)和rs11085754(OR=1.45,95%CI=1.04-2.02)两个位点。

目的观察SD大鼠皮下C6胶质瘤模型放疗前后18F-氟硝基咪唑正电子发射断层显像-X线计算机断层成像(18F-Fluoromisonidazol Positron Emission Tomography/Computed Tomography,18F-FMISO PET/CT)的显像特点,评估熊果酸(Ursolic acid,UA)在胶质瘤模型中的放射增selleck kinase抑制剂敏作用,探讨18F-FMISO PET/CT监测肿瘤放射治疗增敏疗效的可行性。方法将32只皮下C6胶质瘤大鼠模型按随机数字表法分成A、B、C、D 4组,其中A组为对照组、B组为UA治疗组、C组为单纯放疗组,D组为UA联合放疗组,在放疗前、放疗后24h分别采集18F-FMISO PET/CT图像,采集扫描肿瘤最大标准摄取值(Maxiselleck MEK inhibitormal Standardized Uptake Value,SUVmax-T),以同一层面对侧脊柱旁肌肉为对照,采集最大标准摄取值(SUVmax-M),计算两者的比值(T/M)。第二次显像结束后,处死大鼠行HE染色及免疫组织化学法检测肿瘤细胞内乏氧诱导因子(Hypoxia Inducible Factor-1α,HIF-1α)的表Proteases抑制剂达。各组治疗前后T/M值比较用配对样本t检验,4组间T/M值比较采用方差分析,其中每两组比较采用LSD-t检验,等级资料HIF-1α表达及阳性率计分采用Pearson法进行相关性分析。结果(1)第一次显像A、B、C、D各组T/M值分别为1.47±0.20、1.47±0.19、1.48±0.21、1.47±0.20;第二次显像分别为2.84±0.61、2.69±0.80、1.78±0.34、1.12±0.74。

结论:PKC激活剂PMA促进膀胱癌细胞增殖能力,而PKCα抑制剂抑制膀胱癌细胞增殖能力,说明PKCα在膀胱癌增殖中起重要作用,而PKCδ抑制剂促进膀胱癌增殖,说明PMA促进膀胱癌增殖可能是因为激活PKCα亚型,也说明PKCα抑制剂对其它亚型无太大抑制作用。所以我们认为PKCα激活在膀胱癌增殖中起关键性作用,Screening Library抑制其活性可明显抑制膀胱癌细胞增殖能力,推测是通过立早基因c-fos与c-jun起调节作用。 第二部分 目的:进一步探讨PLCε-PKCα信号通路在膀胱癌增殖中的调控及机制。 方法:PLCεshRNA转染膀胱癌BIU-87细胞株,RT-PCR检测对内源性PLCε沉默情况,MTT法检和测对细胞增殖能力影响,Western测定PKCα活性变化,RT-PCR及Western检测下游蛋白c-fos、c-jun表达变化;PKC抑制剂与激活剂处理转染shRNA细胞,MTT观察对增殖活力。 结果:转染PLCεshRNA可明显抑制膀胱癌BIU-87细胞内源性PLCε表达;转染此网站PLCεshRNA可明显抑制可明显抑制膀胱癌BIU-87细胞增殖活力、细胞周期被阻滞于G0/G1期,并使PKCα活性降低及立早基因c-fos、c-jun的表达减少;转染PLCεshRNA对膀胱癌细胞的抑制能力可被PKC激活剂PMA逆转,但如在加入PMA前或同时加入PKCα特异性抑制剂Safingol,则不会被逆转,而加入PKCδ抑制剂Rottlerin仍可被逆转。

由经验丰富的共聚焦显微内镜医师进行图像的选择。选取标准：1、所有经病理证实肠化或慢性炎部位图像；2、每一病变部位选取连续、清晰图像6-8张。 图像评价：将共聚焦图像播放给两组未参与共聚焦图像存储、抽取及编号的评价者。第一组评价者(经验医师组)学习或使用共聚焦图像超过2年,第二组评价者(初学者组)学习或使用共聚焦图像时间少于1年。此两组评价者分别对每组共聚焦图像按购买PLX3397照现有诊断标准做出判断,是否为肠化,并将其诊断依据标出。 结果： 通过现有的共聚焦诊断胃黏膜肠化标准,能够获得较好的符合率,经验医师组可达92.14%,而初学者组可达82.57%。杯状细胞、绒毛样改变、刷状缘、吸收细胞、杯状细胞+绒毛样改变、杯状细胞+刷状缘、杯状细胞+吸收细胞7项指标各自的符合率分别为80.46%、51.53%、39.selleck好不好

selleck

selleck好不好27%、61.69%、86.78%、81.71%、86.01%,其中以“杯状细胞+绒毛样改变”及“杯状细胞+吸收细胞”效果最好。两组观察者间杯状细胞及柱状吸收细胞指标评价的一致性均较好,而刷状缘及绒毛样改变的一致性较差。 结论： 1.郭玉婷等人提出的共聚焦显微内镜下胃黏膜肠上皮化生的诊断标准对于初步接触共聚焦显微内镜的初学者及使用时间较Depsipeptide长的经验医师均具有较高的准确率,总体准确率分别可达82.57%及92.14%,具有较高的临床应用价值。 2.单用杯状细胞指标进行共聚焦显微内镜下的胃黏膜肠上皮化生诊断时仍具有80%以上的符合率,而利用杯状细胞+绒毛样改变或者杯状细胞+柱状吸收细胞组合指标进行共聚焦显微内镜下胃黏膜肠上皮化生的诊断可以到达现有诊断标准的符合率。 3.杯状细胞及柱状吸收细胞在各观察者间评价的一致性较好,而绒毛样改变及刷状缘则一致性较差。

肽基精氨酸去亚胺酶4(PADl4)是2004年发现的组蛋白去甲基化酶,负责组蛋白精氨酸残基上单甲基化的去甲基化,并催化精氨酸变成瓜氨酸；同时调节非组蛋白的去甲基化,例如EP300、RPS2、ING4和nucleophosmin/B23等。CFLAR是CASP8/10特异的抑制蛋白,能被招募到DISC上,抑制PROCASP8/10切割活化。CFLAR在多种肿瘤如肝癌、结肠癌、黑色素瘤更多、卵巢癌中高表达；很多小分子药物通过降低CFLAR蛋白水平诱导细胞凋亡,所以CFLAR是一个很有前景的肿瘤治疗靶标。研究表明CFLARL与XRCC6结合而稳定CFLARL,乙酰化的XRCC6干扰CFLARL/XRCC6复合物的形成,从而促使CFLARL泛素化降解。但是目前仍不确定CFLARL存在乙酰化修饰。质谱实验表明CFLARL含有一个甲基化位点。我们的而且目的是确定CFLARL是否存在乙酰化和甲基化修饰,并研究翻译后修饰的CFLARL在细胞中的作用和调控机制。研究方法1.利用siRNA干扰和基因过表达实验研究特定蛋白在信号转导通路中的作用；2.利用SRB实验检测肿瘤细胞存活率；3.利用western Blot实验检测细胞内相关蛋白表达水平；4.利用免疫共沉淀和GST pull down实验研究蛋白间相互作用selleck抑制剂和特定蛋白的翻译后修饰；5.利用流式细胞术检测细胞凋亡；6.利用荧光显微镜观察蛋白在细胞中的定位。实验结果1.蛋白酶体抑制剂PS-341显著诱导DDIT3表达,并呈剂量和时间依赖性。2.在DDIT3 siRNA转染的细胞中,PS-341诱导的TNFRSF10B水平明显降低,CASP8、CASP9、CASP3、PARP1的切割片段减少；流式细胞分析法检测细胞凋亡,发现在DDIT3 siRNA转染的细胞中,PS-341诱导的细胞凋亡降低。

（1）应用MTS法或SRB法检测PKI对耐药细胞和敏感细胞的细胞毒性，并选取IC10以内的用量与底物类抗癌药共同作用，检测其恢复MDR肿瘤细胞对抗癌药敏感性的效果;（2）应用流式细胞术分别以Rh-123、MX、ADR为荧光底物检测耐药细胞中PKI对于P-gp、BCRP、MRP1作为药物外排泵的功能活性的影响；（3）应用Western Blot检测PKI对耐药细胞中P-gp、B也许CRP、MRP1蛋白表达水平的变化，及其对细胞内增殖信号分子的影响;（4）应用Realtime PCR检测PKI对耐药细胞中耐BCRP基因表达的水平的影响。（5）超速离心法制备含MDR-ABC的粗膜；应用P-gp-GloTMAssay Sysetem检测ATPase活性。 结果： (1).以P-gp表达的K562/A02及其亲本细胞K562为模型体外这个评价Midostaurin逆转P-gp介导MDR的效果。Midostaurin500nM无毒浓度下，在细胞水平即可有效逆转K562/A02对多种底物的耐药；Midostaurin能显著抑制P-gp的外排作用，增加底物Rh-123在K562/A02细胞中的积累；Midostaurin对P-gp的ATPase活性具有明显的抑制作用；0.5μM的MidosBVD-523taurin对P-gp基因与蛋白表达水以及AKT和ERK的表达与磷酸化水平均无影响。 (2).以耐药细胞株K562/A02， HEK293/BCRP，HEK293/MRP1及其相应敏感细胞株K562， HEK293/VEC为模型，研究了Sorafenib体外逆转肿瘤细胞MDR的作用和机制。Sorafenib在2.5μM无毒浓度下可有效逆转BCRP高表达耐药细胞对底物MX、ADR和TOPT的耐药，对P-gp和MRP1无明显逆转作用。

p.)、模型对照组(saline,1ml·100g-1,i.p.)、卡托普利组(captopril,30mg·kg-1,i.g.)、CAP干预组(CAP,2.0g·kg-1,i.p.)。采用大鼠腹主动脉缩窄术复制POH模型。于术后第8周测定心功能及血液指标,包括心率(HR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉压(MBP)、左室收缩峰压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、室内压最大上升速率(+dp/dtmax)、室内压最大下降速率(-dp/dtmax)、左室质量指数(LVMI)、AngⅡ、ET、ALD、ANP、NO、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)。取部分左室游离壁中段心肌组织,经全自动图象分析系统行图象分析:HE染色观察心肌病理改变并测量各组心肌细胞直径(MD);Masson染色观察心肌胶原变化并计算心肌胶原容积分数(CVF)。

寻找更多 结果: 1、POH组HR为384.0±21.5,SBP、DBP、MBP分别为28.12±1.75、18.24±1.18、24.78±1.27,与假手术对照组相比均有显著性差异(P<0.05或P<0.05或P<0.05或P<0.05),不同浓度的CAP(4.8mg·L-1、0.48mg·L-1)caspase-3活性分别为1.2±0.4、1.8±0.5,明显低于AngⅡ组(P<0.05或P<0.01)。AngⅡ组Bcl-2蛋白表达显著降低为11.95±3.98,与空白组相比有显著性差异(P<0.01),不同浓度的CAP(4.8mg·L-1、0.48mg·L-1)组Bax蛋白表达分别为22.26±6.53、17.34±4.05,明显高于AngⅡ组(P<0.05或P<0.01),不同浓度的CAP(4.8mg·L-1、0.48mg·L-1)组CaN蛋白表达分别为11.28±2.68、14.82±3.67,明显低于AngⅡ组(P<0.05或P
研究背景

可能 心血管病变是糖尿病患者的主要死亡原因,其大血管病变(主要是动脉粥样硬化)和微血管病变是糖尿病病人致病率和死亡率最主要的原因之一。糖尿病导致心血管病的机制是复杂的、多方面的,其中血管内皮功能异常是糖尿病血管并发症发生的重要因素。高血糖可通过糖基化终末产物(AGEs)途径、多元醇途径、蛋白激酶C激活途径、己糖胺途径和氧化应激等多种机制导致血管内皮细胞功能不全,其损伤的机理并不十分清楚,其中高糖诱导内皮细胞凋亡是研究重点和热点之一。 细胞凋亡(apoptosis),亦称为程序化的细胞死亡(Programmed cell death,PCD),是一种不同于细胞坏死的生理性或者病理性的死亡过程,它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等多个方面。目前认为,细胞凋亡在器官发育、伤口愈合、免疫反应等过程中调控细胞增殖与更新间的平衡,维持组织器官正常生理功能及细胞数量的相对稳定。高胰岛素血症、AGEs、血管紧张-Ⅱ、氧化的LDL、活性氧(reactive oxygen species,ROS)以及炎性细胞因子等多种因素均可诱导血管内皮细胞发生凋亡。研究证实,高糖诱导活性氧的产生,而活性氧进一步能引起细胞功能失调,甚至细胞死亡。细胞凋亡在高糖对内皮细胞损伤过程中扮演重要的角色。因此,防治高糖诱导的内皮细胞的凋亡在预防糖尿病血管并发症方面具有重要的作用。 Selleck GDC-941 研究证明,Akt的激活能促进内皮细胞的存活。Akt,又称PKB,是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,主要通过PI-3K激活。Akt的Ser-473和Thr-308位点被磷酸化后,产生一系列生物学效应。PI-3K在多种死亡信号诱导的细胞死亡过程中起着重要的预防作用。Akt能引起抗凋亡基因家族bcl-2的表达,激活内皮源性的一氧化氮合酶(endothelial

nitric oxide synthase,eNOS),从而产生NO防止超氧阴离子产生歧化产物。因此,PI-3K/Akt/NO信号通路在防止ROS诱导的内皮细胞凋亡方面发挥着重要的作用。因此,该信号通路是本研究的焦点之一。 NF-κB是多种信号通路的交汇点,NF-κB的激活能控制炎症反应、细胞生长、存活和凋亡过程中的多个基因的转录。最近的研究证明,NF-κB的激活能下调促凋亡的JNK信号途径,进而预防多种细胞类型的凋亡。但是,对于内皮细胞而言,NF-κB的激活能促进凋亡,ROS依赖的NF-κB的激活在高糖诱导的内皮细胞凋亡过程中具有重要作用。因此,NF-κB途径也是研究的重点之一。 西红花酸是西红花(Crocus sativus L.)提取物的有效成分之一(近年从栀子中也成功提取出相同的有效结构),有多不饱和共轭烯酸结构,属于类胡萝卜素类。研究表明西红花酸具有抗肿瘤、抗动脉粥样硬化、降血脂、心肌保护、肝脏保护以及精神神经疾病的保护治疗作用。西红花酸对糖尿病亦具有有益的保护作用。但是,西红花酸是否能抑制高糖诱导的内皮细胞凋亡,国内外未见报道。因此,本文通过内皮细胞的体外培养,建立高糖诱导内皮细胞凋亡模型,从生化指标、形态学、蛋白表达等多方面比较系统地观察了西红花酸对高糖诱导内皮细胞凋亡的抑制作用并探讨其可能的机制,为西红花酸在临床用于防治糖尿病及其血管并发症提供理论依据。 第一部分高糖体外诱导内皮细胞凋亡及西红花酸对其抑制作用的观察 目的 观察高糖对人脐静脉内皮细胞的促凋亡作用及西红花酸对其抑制作用。 方法 取健康、足月新生儿产后的新鲜脐带,原代培养、传代脐静脉内皮细胞并根据细胞的形态、生长习性以及Ⅷ因子抗原等鉴定。选生长良好的HUVECs第3-5代用于试验。试验分为:①对照组(NG):含有终浓度5.5mM的葡萄糖,与内皮细胞共同培养24,36,48h。②高糖15组(HG15):含有10%胎牛血清的RPMI1640培养液和含终浓度为15mmol/L的葡萄糖,与内皮细胞共同培养24,36,48h。②高糖组33(HG33):含有终浓度为33mM的葡萄糖,与内皮细胞共同培养24,36,48h。③高糖组+西红花酸组:不同终浓度的西红花酸(0.01,0.1,1.