6%(53/72)、26.7%(8/30)、14.3%(3/21),三者间比较差异有统计学意义(χ~2=33.15,P<0.01)。VASH1的表达在NSCLC的淋巴结转移、TNM分期和分化程度方面差异有统计学意义(均P
Preclinical 更多 modelling studies are beginning to aid development of therapies targeted against key regulators of pancreatic cancer progression. Pancreatic cancer is an aggressive, stromally-rich tumor, from which few people survive. Within the tumor microenvironment cellular and extracellular components exist, shielding tumor cells from immune cell clearance, and chemotherapy, enhancing progression of the disease. The cellular component

of this microenvironment consists mainly of stellate cells and inflammatory cells. New findings suggest that manipulation of the cellular component of the tumor microenvironment is possible to promote

immune cell killing of tumor cells. Here we explore possible immunogenic therapeutic strategies. Additionally extracellular stromal elements play a key role in protecting tumor cells from chemotherapies targeted at the pancreas. We describe the experimental findings and the pitfalls associated with translation of stromally targeted therapies to clinical trial. Finally, we discuss the key inflammatory signal transducers activated subsequent to driver mutations in oncogenic Kras in pancreatic cancer. We present the preclinical findings that have led to successful Checkpoint activation early trials of STAT3 inhibitors in pancreatic adenocarcinoma.
Since the discovery that non-small cell lung cancer(NSCLC) is driven by epidermal

growth factor receptor(EGFR) mutations, the EGFR tyrosine kinase inhibitors(EGFR-TKIs, e.g., ge fi tinib and elrotinib) have been effectively used for clinical treatment. However, patients eventually develop drug resistance. Resistance to EGFR-TKIs is inevitable 还有 due to various mechanisms, such as the secondary mutation(T790M), activation of alternative pathways(c-Met, HGF, AXL), aberrance of the downstream pathways(K-RAS mutations, loss of PTEN), impairment of the EGFR-TKIs-mediated apoptosis pathway(BCL2-like 11/BIM deletion polymorphism), histologic transformation, ATP binding cassette(ABC) transporter effusion, etc. Here we review and summarize the known resistant mechanisms to EGFR-TKIs and provide potential targets for development of new therapeutic strategies.
2014年8月,对肺右下叶2 cm结节施行单切口胸腔镜亚肺叶切除术,术后病理诊断为肺炎性肌纤维母细胞瘤(inflammatory myofibroblastic tumor,IMT),随访1年余,无复发、转移。
Gastric cancer is one of the most lethal cancers worldwide despite many advances and options in therapy.

IL-25、TSLP mRNA在寻常型银屑病患者与正常人外周血中的表达及其差异；2.不同性别的寻常型银屑病患者IL-25、TSLP mRNA表达的差异；3. IL-25、TSLP在寻常型银屑病患者外周血中的表达与银屑病皮损面积及严重程度指数(Psoriasis Area And Severity Index, PASI)的相关性；4. IL-25、 TSLP表达之间的相关性,探讨这两个细胞因子在寻常型银屑病发病中的作用；5.白芍总苷胶囊治疗寻常型银屑病患者4周、8周后外周血中IL-25、TSLP selleck screening library mRNA的表达水平的变化,以探讨白芍总苷胶囊对寻常型银屑病患者的治疗作用。 方法：采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-Time Fluorescence Quantitative Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)的方法,对50例寻常型银屑病患者和40例正常对照者外周血IL-25、TSLP mRNA的表达量进行检测分析。按照PASI的评分标准对50例寻常型银屑病患者进行评分。利用统计软件分析IL-25和TSLP的表达及与PASI评分的相关性,以P0.05)。 3.寻常型银屑病患者外周血中IL-25和TSLP

mRNA的表达量水平与PASI评分均呈负相关(*r=-0.366,*P=0.009;**r=-0.581**P=0.010)。 4.寻常型银屑病患者外周血中IL-25和TSLP mRNA的表达呈正相关,且有统计学意义(r=0.452,P=0.001)。 5.经白芍总苷胶囊治疗4周后,患者PASI评分降低,外周血中IL-25和TSLP mRNA的表达水平比治疗前升高,且均有统计学意义(IL-25的△CT值分别为5.24±1.42.3.13±0.82,t=8.37,P
目的：

本研究应用稳定表达GLUT4myc的L6GLUT4myc和C2C12GLUT4myc两种骨骼肌细胞模型探讨去极化和收缩调节GLUT4myc转位的机制。 方法： 第一部分比较55mM高钾溶液诱发的L6GLUT4myc肌管去极化和C2C12GLUT4myc肌管收缩对GLUT4myc转位的影响。测定两种细胞GLUT4myc转位响应高钾作用的时间曲线。第二部分比较55mM高钾溶液刺激L6GLUT4myc肌管和C2C12GLUT4myc肌管GLUT4myc转位过程中的信号分子的作用,检测信号分子的磷酸化。在C2C12GLUT4myc肌管中通过使用不同蛋白激酶抑制剂,分析高钾刺激GLUT4myc转位的信号机制。 很少 结果： L6GLUT4myc肌管的GLUT4myc转位对高钾诱发的去极化作用呈时间依赖关系,最大值为基础状态的1.67±0.41倍(P<0.05)：C2C12GLUT4myc肌管的GLUT4myc转位对高钾诱发的收缩作用同样呈时间依赖关系,最大值为基础状态的1.51±0.15倍(P<0.05)的GLUT4myc的转位,钙离子螯合剂BAPTA-AM可抑制42%(P<0.05)的GLUT4myc的转位,CaMKⅡ抑制剂KN93可抑制50%(P
肌肉是动物机体利用葡萄糖最重要的组织,其糖代谢是维持机体内环境稳定的重要基础,大量的研究集中在胰岛素刺激葡萄糖转运的信号转导通路上。胰岛素和运动均促使葡萄糖转运子4转位到细胞膜上,转运更多的葡萄糖进入细胞而调节细胞的葡萄糖摄取量。普遍认为,胰岛素和运动引发的葡萄糖转运机制是完全不同的,胰岛素激发的葡萄糖转运主要依赖于P13K的激活,而运动导致的糖摄取则可能有Ca2+和AMPK的参与。相对于胰岛素,对运动/肌肉收缩刺激骨骼肌摄取葡萄糖的机制了解较少。

Bortezomib 目前研究运动/肌肉收缩多应用转基因动物,但成本高,操作复杂。而应用培养的细胞株则没有诸多限制,费用较低,并可单独分析细胞内信号转导。 本研究的目的是应用稳定过表达GLUT4myc的能收缩的C2C12GLUT4myc小鼠骨骼肌细胞模型探讨运动/肌肉收缩刺激骨骼肌细胞GLUT4运输机制中AMPK和CaMKⅡ的作用。 方法： 第一部分确定C2C12GLUT4myc细胞的培养和分化条件。测定此细胞的GLUT4myc转位响应Carbachol刺激的时间曲线,并用Western blot法检测Carbachol对AS160的调节作用。 第二部分测定在Carbacho1刺激下骨骼肌细胞内Ca2+浓度的变化。 第三部分在AMPK和CaMKⅡ的特异性药物抑制剂存在的条件下,测定收缩刺激GLUT4myc转位,并用Western blot法检测高钾溶液和Carbachol对ACC、 AMPK、CaMKⅡ和CaMKⅠ的调节作用,研究AMPK和CaMKⅡ在收缩刺激GLUT4myc转位中的作用。 结果： 第一部分比较不同浓度Carbachol刺激的C2C12GLUT4myc肌管GLUT4myc转位,结果显示,C2C12GLUT4myc细胞的GLUT4myc转位对Carbachol的作用呈剂量和时间依赖关系。0.1mM和1mM的Carbachol刺激均增加细胞表面GLUT4myc含量,0min为基础状态,0.1mM Carbachol刺激20min使GLUT4myc转位达最大值,为基础状态的(1.91±0.41)倍(p<0.

01）。 3.5左归丸含药血清活化JNK和p38MAPK信号通路有助于磷酸化Smad2/3和上调ColI蛋白表达 结果显示，与control组比较，ZG和BML均能显著诱导MC3T3-E1细胞Smad2/3蛋白磷酸化和上调ColI蛋白表达水平（P＜0.01）；对p-Smad2的诱导作用，ZG组显著优于BML组（P＜0.01），对ColI蛋白表达的上调作用，ZG组优于BML组（P＜0.05），对p-Smad3的诱导作用，两组比较无统计学意义（P>0.05）；加入SP600125或SB203580后，显著抑制ZG和BML对MC3T3-E1细胞Smad2/3蛋白磷酸化的诱导作用（P＜0.01），显著抑制ZG对MC3T3-E1细胞ColI蛋白表达的上调作用（P＜0.01），加入SP600125后显著抑制BML诱导的ColI蛋白表达（P＜0.01），加入SB203580后抑制BML诱导的ColI蛋白的表达（P＜0.05）。

3.6左归丸含药血清干预Smad4、Runx2和ColI mRNA表达作用及JNK和p38MAPK通路对其影响 结果显示，与control组比较，ZG和BML均能显著上调MC3T3-E1细胞Smad4、Runx2和ColI mRNA的表达（P＜0.01）；对Smad4和Runx2mRNA表达诱导作用ZG组与BML组比较无统计学意义（P>0.05），对ColI mRNA诱导作用ZG组显著优于BML组（P＜0.01）；加入SP600125后，对ZG诱导Smad4和Runx2mRNA表达的抑制作用没有统计学意义（P>0.05），可以显著抑制ZG诱导的ColI

没有 一般 mRNA表达（P＜0.01），对BML诱导的ColI mRNA表达的抑制作用没有统计学意义（P>0.05），可以抑制BML诱导的Smad4和Runx2mRNA的表达（P＜0.05或P＜0.01）；加入SB203580后，对ZG诱导Smad4mRNA表达的抑制作用没有统计学意义（P>0.05），可以显著抑制ZG诱导的Runx2和ColI mRNA表达（P＜0.01），对BML诱导的Smad4mRNA表达的抑制作用没有统计学意义（P>0.05），可以抑制BML诱导的Runx2和ColI mRNA的表达（P＜0.05或P＜0.01）。 结论： 1.左归丸含药血清具有诱导MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化作用。 2.JNK、p38MAPK/Smads信号级联参与MC3T3-E1细胞的增殖与分化。 3.左归丸含药血清可能部分通过活化JNK和p38MAPK通路调控MC3T3-E1细胞功能。 4.左归丸含药血清可能部分通过对JNK、p38MAPK/Smads信号级联的调节而达到促骨形成作用。
细菌性脓毒症及其伴随的严重的并发症是临床常见的、威胁生命的疾病。而所有这些并发症的一个共同点就是内皮细胞损伤和功能障碍。肺微血管内皮细胞（PMVECs）是肺组织的重要实质细胞，在肺损伤过程中既是首位受损伤的靶细胞，又是活跃的炎症细胞和效应细胞，在疾病发生发展中起关键作用。因此，深入探讨PMVECs损伤机制在肺循环疾病的研究中至关重要。 感染尤其是革兰氏阴性菌脓毒症是急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征（ALI/ARDS）等肺循环疾病的主要病因。细菌脂多糖（LPS）作为革兰阴性杆菌外膜上的一种糖蛋白，在体内可引起强烈的炎症反应，直接或间接损伤PMVECs，在感染性ALI/ARDS的病理过程中起关键作用。炎性刺激下PMVECs损伤的调控机制涉及复杂的信号转导途径。研究发现，在ALI/ARDS、肺动脉高压、肺癌等疾病的发生发展中均有RhoA/Rho激酶（ROCK）信号通路的参与。RhoA/ROCK通路作为体内普遍存在的一条信号通路，在细胞的信号转导过程中起着信号转换器或分子开关的作用，能够诱发肌动蛋白细胞骨架重排、调控基因转录及细胞周期进程等。然而，RhoA/ROCK通路在LPS诱导的大鼠PMVECs损伤中的调节机制以及与其他信号通路的交叉反应尚需进一步研究。因此，本实验以LPS诱导大鼠PMVECs损伤为模型，观察RhoA/ROCK通路在PMVECs损伤中的变化。并通过细胞免疫化学、流式细胞术、激光共聚焦及细胞分子生物学等技术研究ROCK抑制剂法舒地尔对LPS诱导的大鼠PMVECs损伤的影响，深入探讨其下游信号转导机制。第一部分RhoA/ROCK通路参与LPS诱导的大鼠肺微血管内皮细胞损伤

因为 目的：研究RhoA/ROCK通路在LPS诱导的大鼠PMVECs损伤中的变化及可能机制。 方法：组织贴块法原代培养大鼠PMVECs，Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学染色及透射电镜观察细胞超微结构鉴定大鼠PMVECs；MTT及乳酸脱氢酶（LDH）法测定PMVECs细胞活力；RT-PCR检测RhoA、ROCK1mRNA的表达；Western blot检测MYPT1磷酸化水平。 结果：1PMVECs体外培养及鉴定 采用组织贴块法并加以改良成功培养出大鼠PMVECs，去除组织块继续培养3~5天后，基本形成细胞单层，汇合呈典型的铺路鹅卵石状排列。VIII因子相关抗原免疫细胞化学染色表明，约95%的细胞表现为阳性。电镜结果表明：多数细胞均可观察到质膜突起，即微绒毛；在细胞浆中还观察到W-P小体；另外有大量的质膜小泡（又称吞饮小泡）存在于细胞浆内，上述结构符合典型的内皮细胞超微结构特征。结合我们的取材部位为肺外边缘组织，因此可以证实分离培养的细胞的确为肺微血管内皮细胞。2LPS对大鼠PMVECs细胞生长的影响及法舒地尔的干预作用 MTT实验结果表明：与对照组（OD值为0.95±0.12）相比，0.01、0.1、1μg/ml LPS对大鼠PMVECs生长没有明显影响；而10、100μg/ml LPS处理组OD值分别降为0.75±0.19（P <0.05或P<0.

以腹主动脉为肝脏的输入动脉,门静脉主干为肝脏的输入静脉。第二步：于显示各叶较好的层面分别划出肝左外叶、左内叶、右前叶及右后叶的ROI,获取并记录各肝叶的血流灌注参数：包括肝动脉灌注量(hepatic arterial perfusion, HAP),门脉灌注量(portal venous perfusion, PVP),总肝灌注量(total liver perfusion,

TLP),肝动脉灌注指数(hepatic arterial perfusion index, HPI)。每个肝叶测量3次,取12个ROI的均值作为全肝的平均血流量。比较正常对照组与乙肝性肝硬化组、胆汁性肝硬化组、血管性肝硬化组及异常三组两两比较的TTP和肝脏各血流灌注参数的变化；血管性肝硬化组中下腔静脉肝段狭窄型与肝静脉闭塞型布-加综合征(BCS)的肝脏各血流灌注参数变化。结果 Fedratinib体外 1.乙肝性肝硬化组腹主动脉、门静脉、脾脏及肝脏的TTP较正常组延长,除腹主动脉TTP无统计学意义(P>0.05)外,其余三者的TTP都具有统计学差异(P0.05)外,其余两者的TTP都具有统计学差异(P0.05)。4.乙肝肝硬化组与胆汁性肝硬化组的腹主动脉、门静脉、脾脏及肝脏的TTP差异均无统计学意义(P>0.05)。5.乙肝性肝硬化组腹主动脉、门静脉、脾脏及肝脏的TTP较血管性肝硬化组延长,除腹主动脉、肝脏的TTP无统计学意义(P>0.05)外,余二者的TTP有统计学意义(P0.05)外,余二者的TTP都有统计学意义(P<0.05)。7.乙肝肝硬化组HAP、PVP、TLP下降,HPI上升,均有统计学意义(P0.05);

因为 PVP、TLP下降,HPI上升,有统计学意义(P0.05)；PVP、TLP下降,有统计学意义(P0.05)。11.胆汁性肝硬化组HAP、HPI较血管性肝硬化组上升,PVP、TLP下降,无统计学意义(P>0.05)。12.乙肝性肝硬化组HAP、TLP较血管性肝硬化组下降,HPI上升,无统计学意义(P>0.05);PVP下降,有统计学意义(P<0.05)。13.下腔静脉肝段狭窄型布-加综合征的HAP、HPI较肝静脉闭塞型布-加综合征上升,有统计学差异(P0.05)。结论1.256层CT肝脏灌注成像简便易行,能反映正常肝脏、乙肝性、胆汁性及血管性肝硬化的血流动力学变化,PVP、TLP的变化有助于肝硬化的诊断,可作为影像随访手段之一。2.乙肝性与胆汁性肝硬化的TTP及肝脏各血流灌注量不具差异性,两者与血管性肝硬化对比具有显著差异,但没有一个特定指标将三型区分开来,说明CT肝脏灌注成像对肝硬化分型诊断不具特异性。3.下腔静脉肝段狭窄型BCS的HAP、HPI较肝静脉闭塞型BCS增加。
发光材料自始至终贯穿在人类文明的历史长河。它广泛应用于通讯、卫星、雷达、显示、记录、光学计算机、生物分子探针等高科技领域。特别是己进入信息时代的今天,满足各种信息显示需求的发光材料发展尤为迅速。发光材料可分为无机发光材料和有机发光材料两大类。与无机材料相比,有机材料具有更高的发光效率和更宽的发光颜色选择范围,并且具有容易大面积成膜的优越性。近年来,关于有机发光材料的研究愈来愈引起人们的兴趣。有机物发光领域包括光致发光、电致发光、化学发光、生物发光等。本文基于共轭有机分子在固态时表现出优异的荧光性质设计合成了基于蒽中心的线形和十字形的两类共轭有机分子,并进行了聚集增强荧光及电致发光器件等光电性质方面的研究,内容如下：我们设计合成了十字形2,6–二(对-N,N二丁基胺基苯乙烯基)-9,10-二(对-吡啶乙烯基)蒽(DAB),一个具有聚集增强荧光效应的D-A交叉共轭结构,其中主要探究了它的单/双光子吸收效应、固态压致变色行为和在不同溶剂中的荧光特性。发现DAB具有较强的溶剂化效应以及它的双光子吸收截面具有溶剂依赖性。在二氯甲烷、四氢呋喃、甲苯中测得的最大双光子吸收截面分别为670

一般 GM、1840 GM和2030 GM。压致变色实验表明了DAB固体的荧光颜色和发射光谱通过碾磨和退火可以在红色(617 nm)和深红色(654 nm)之间可逆转变。我们通过改变端基的键接位置,合成了9,10-(N-苯基咔唑-2-乙烯基)蒽(CZ2),9,10-(N-苯基咔唑-3-乙烯基)蒽(CZ3)和9,10-(4-苯乙烯基-9-苯基咔唑)蒽(CZ9)三个化合物,并研究了异构体效应对荧光和电致发光性能的影响。结果显示无论是在结晶态和无定形态,N-苯基咔唑的链接位置都会影响其荧光发射性能。这三种异构体都有很强的结晶增强荧光发射(CEE),CZ9在结晶态时的荧光发射效率最强,而在无定形态时的荧光发射效率最弱。当CZ9这种异构体通过真空蒸镀法制备成电致发光器件时,器件的最大发光效率,最大亮度和起始电压分别为0.10cd/A,550 cd/cm-2和7.

01)，提示染铅组大鼠体内~(45)Ca~(2+)摄入远低于对照组。各组大鼠骨钙含量比较结果为：对照组＞高钙铅处理组＞铅处理组＞低钙铅处理组，而大鼠骨骼中铅含量结果则与之相反，雌雄均呈类似趋势。铅处理组和低钙铅处理组雄性大鼠骨铅水平相近，其余组间骨钙和骨铅差异显著(p＜0.05)，统计分析发现二者呈直线负相关。激光共聚焦扫描电镜观察Fluo-3／AM分子探针标记的成骨细胞内Ca~(2+)荧光时发现，胞内游离Ca~(2+)浓度在铅作用下升高。证实铅对体内外钙的吸收均有着显著的抑制作用。 通常 5．大鼠血液OC值在对照组中最大，其次为高钙铅处理组，铅处理组列第三，均高于低钙铅处理组，组间差异明显。雌雄类似，但雄性中尤其明显。与之相反的是，大鼠血液PTH含量则表现为低钙铅处理组中最高，其次为铅处理组、高钙铅处理组和对照组。除雄性大鼠铅处理和高钙铅处理组外，其余大鼠各组间PTH含量差异极显著。统计分析结果显示，大鼠OC和PTH之间并不存在直线负相关；但作散点图分析发现，OC和PTH之间存在负相关的趋势。PTHr1在低钙铅处理组中高表达，而在对照组中低表达，高钙铅处理组表达量高于对照组但低于铅处理组。OC的表达趋势与PTHr1相反，对照组和高钙铅处理组中OC高表达，低钙铅处理组中表达量极少，铅处理组表达则稍多于低钙铅处理组。结果表明铅影响了大鼠体内骨相关蛋白及其受体的表达。 6．大鼠股骨OB及UMR106细胞电镜超微结构显示，铅使两类细胞结构不同程度改变，尤其是线粒体和粗面型内质网的结构变化较大，但对于细胞膜系统的损伤则仅在高浓度时出现。结果表明铅损伤了成骨细胞的结构。

7．铅使UMR106细胞贴壁性下降，OB的形态发生改变。OB和UMR106细胞ALP、CollagenⅠ随铅浓度的增加而表达减少，提示铅影响了成骨细胞的形态及标志物的表达；铅降低了成骨细胞OC的分泌，并使OC的调节因子如bFGF、cbfa1／osf2、c-fos和c-jun的表达减少；铅明显促进p-ERK1／2的表达，ERK1／2途径的特异性阻断剂PD98059可使铅对UMR106的这种作用减弱或消失，但对于总ERK1／2的表达并无影响。表明MAPK(ERK1／2)信号转导转导途径可能参与了铅对成骨细胞毒性作用的调控。 SCH900776 综上所述，铅抑制了骨骼的正常生长发育，低钙处理加剧了其作用，而适量的钙补充有利于减轻铅对于骨骼生长的抑制作用。铅对于骨骼生长发育的毒性与铅干扰机体钙的吸收和利用，以及与铅对OC表达的直接或间接影响相关，其中可能有ERK1／2信号转导途径的参与。
原发性支气管肺癌(简称肺癌)，是最常见的肺部原发性恶性肿瘤。世界上至少有35个国家的男性肺癌在各种癌症死因中占第一位，女性中死于肺癌的患者也仅次于乳腺癌的死亡人数。研究表明组蛋白的乙酰化状态对参与细胞增殖和分化的基因表达具有重要调控作用，因此，基于组蛋白乙酰化的治疗策略逐渐引起重视。本文主要研究了组蛋白去乙酰基酶(histone

deacetylases，HDAC)抑制剂(histone deacetylases inhibitor，HDACI)TSA(Trichostatin A)对肺腺癌细胞A549的生命活动包括细胞周期及凋亡的影响，并且对特异Ⅱ型肺细胞标志——muc1基因和细胞周期调节因子cdc2基因启动子区的染色质重塑机制以及转录相关因子的结合进行了研究，为非小细胞肺癌的临床治疗提供一定的理论依据。 一、TSA对肺腺癌细胞A549的细胞周期及凋亡的影响 1．TSA对肺腺癌细胞A549的细胞周期的影响 400nM TSA处理A549后，进行流式细胞仪检测结果显示：TSA可以引起A549细胞周期在G1期和G2／M期产生阻滞，以G2／M期阻滞更为显著。同时发现TSA也抑制G2／M期细胞周期相关因子cdc2，cdc25c以及cyclinB2的mRNA的表达，促进G1期细胞周期相关因子p21 mRNA的表达。 2．TSA对肺腺癌细胞A549凋亡的影响 流式细胞仪检测结果显示400nM TSA处理16小时起A549细胞开始出现凋亡，随着TSA处理时间的延长，凋亡程度逐渐加重；同时western blotting结果显示400nM TSA处理16小时起，PARP开始出现断裂，随着时间的延长PARP断裂程度逐渐加重。 二、TSA与p53对muc1基因及cdc2基因启动子活性的影响 1．TSA对muc1基因及cdc2基因启动子活性的影响：构建带有人2.4kb的muc1基因上游调控区序列以及cdc2基因启动子区的-758／+61的CAT报告基因质粒pREP4m-muc1-2.4k与pREP4m-cdc2-CAT。将含有报告基因表达质粒pREP4m-muc1-2.4k和pREP4m-cdc2-CAT以及内参照质粒pM-CAT瞬时共转染A549细胞之后加入TSA进行诱导处理，启动子活性分析结果表明：TSA可以抑制muc1和cdc2基因的启动子活性。将muc1基因上游调控区进行删切，构建不同长度(4k、1.6k、298bp、724bp)启动子序列驱动的报告基因质粒，启动子活性分析结果表明：TSA对muc1基因转录活性的抑制可能通过muc1基因启动子区-724上游的调控区介导。

PR-957体内 2．p53对muc1基因及cdc2基因启动子活性的影响：p53表达质粒与pREP4m-muc1-2.4k和pREP4m-cdc2-CAT以及pM-CAT瞬时共转染A549细胞，启动子活性分析结果表明，p53可以降低muc1基因和cdc2的启动子活性，突变的p53表达质粒可以减弱这种抑制作用，TSA处理可以加强p53对muc1基因的抑制，同时western blotting结果显示TSA处理可以促进p53的表达，提示TSA可能通过p53间接调节muc1基因的表达。将muc1基因上游调控区的两个CCAAT盒以及一个潜在的p53半位点分别进行突变后与pM-CAT瞬时共转染A549细胞，启动子活性分析结果显示，潜在的p53半位点突变后p53抑制muc1基因启动子区活性的作用急剧减弱。这些结果提示，p53可能通过p53结合位点发挥对muc1基因的调节作用。 三、TSA对染色质重塑蛋白及修饰因子对muc1基因启动子活性的影响 1．PCAF与p300对muc1基因启动子活性的影响：PCAF表达质粒或p300表达质粒与pREP4m-muc1-2.4k和pM-CAT瞬时共转染A549细胞，启动子活性分析结果表明，PCAF和p300可以增强muc1基因启动子的活性。 2．BRG1与BRM对muc1基因启动子活性的影响：BRG1表达质粒(或其显性负突变体)与pREP4m-muc1-2.4k和pM-CAT瞬时共转染A549细胞后，启动子活性分析结果表明，BRG1表达质粒抑制muc1基因启动子的活性；BRM表达质粒(或其显性负突变体)与pREP4m-muc1-2.

6%)高于对照组(80.0%),差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者血淀粉酶以及白细胞达到正常范围的时间、腹痛症状改善时间与住院天数方面显著短于对照组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论参麦注射液联合生长抑素治疗重症急性胰腺炎效果显著,可以明显改善患者血清TNF-α、IL-6及IL-10水平。
目的探讨Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ对Src蛋白及其下游信号作用。方法采用半定量RT-PCR法检测Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ处理后的人膀胱癌细胞T24各浓度组(0、0.2、1.0、5.0μmol/mL组)的c-Src、p38MAPK基因表达的变化情况,使用Western blot检测Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ处理后T24细胞内的c-Src蛋白磷酸化类型与非磷酸化类型的表达情况。结果 Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ处理有下调后的人膀胱癌细胞T24各浓度组的c-Src mRNA的表达下调;p38基因的表达呈逐渐下调趋势。处理后T24细胞内c-Src基因在蛋白表达水平上其磷酸化类型随Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ浓度的增高表达逐渐下降,并且呈剂量效应关系。结论 Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ可能通过竞争Src蛋白磷酸化位点,使其不能激活,导致下游的细胞传导途径失活使得T24细胞增殖得到抑制,认为Src蛋白具有作为膀胱移行细胞癌分子靶向治疗的潜在靶点的可能性。Src酪氨酸激酶抑制剂Ⅱ可能可以通过阻止Src蛋白激活影响其下游的Ras/Raf/MEK/MAPK(ERK1/2或p38)通路和ERK1/2和p38细胞信号传导通路,下调p38表达不仅直接和间接地诱导T24细胞凋亡,而且可以阻止或减少T24细胞的迁移、扩散和穿膜侵袭的发生。
目的分析并探讨支气管哮喘患儿吸入糖皮质激素对生长发育的影响情况。方法择取我院所收治的支气管哮喘患儿60例作为研究对象,均接受小剂量糖皮质激素吸入治疗。选择同期健康儿童60例作为对照组。对两组进行为期1年的随访调查,就身高、体重、骨代谢水平进行综合对比与分析。结果哮喘组患儿1年内身高增长均值、体重增长均值、骨密度水平均值与对照组对比无明显差异(P>0.05),无统计学意义。结论以小剂量吸入糖皮质激素方法对支气管哮喘患儿进行治疗,对儿童生长发育无明显不良影响,可作为临床常规用药方案,具有安全性优势,值得进一步推广。
目的通过分析丝裂原和应激激活蛋白激酶1(MSK1)在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)中的表达情况探讨中药复方益肾达络饮保护小鼠损伤脑组织的机制。方法利用蛋白印迹技术,检测小鼠脑组织中MSK1、CREB的含量。结果脑组织中MSK1表达显示,正常组和中药组、激素组、抑制剂组均有显著性差异(均P<0.01);模型组和抑制剂组有显著性差异(均P<0.01);中药组和激素组、抑制剂组有显著性差异(P<0.01);中药组和模型组、中药加激素组有差异(均P<0.05)。CREB表达显示:中药组CREB的表达与其余各组相比均显著升高(P<0.01);中药组、中药加激素组和激素组的CREB水平依次降低。结论复方益肾达络饮治疗EAE与MSK1升高有关,p38MAPK信号通路下游因子MSK1表达与其底物CREB表达呈相同态势。
Colorectal

VEGFR 抑制剂 drug 还有 cancer(CRC)remains one of the most common malignancies in 哪里 the world.Although surgical resection combined with adjuvant therapy is effective at the early stages of the disease,resistance to conventional therapies is frequently observed in advanced stages,where

treatments become ineffective.Resistance to cisplatin,irinotecan and 5-fluorouracil chemotherapy has been shown to involve mitogen-activated protein kinase(MAPK)signaling and recent studies identified p38αMAPK as a mediator of resistance to various agents in CRC patients.Studies published in the last decade showed a dual role for the p38αpathway in mammals.Its role as a negative regulator of proliferation has been reported in both normal(including cardiomyocytes,hepatocytes,fibroblasts,hematopoietic and lung cells)and cancer cells(colon,prostate,breast,lung tumor cells).This function is mediated by the negative regulation of cell cycle progression and the transduction of some apoptotic stimuli.However,despite its anti-proliferative and tumor suppressor activity in some tissues,the p38αpathway may also acquire an oncogenic role involving cancer related-processes such as cell metabolism,invasion,inflammation and angiogenesis.In this review,we summarize current knowledge about the predominant role of the p38αMAPK pathway in CRC development and chemoresistance.In our view,this might help establish the therapeutic potential of the targeted manipulation of this pathway in clinical settings.

5mmol/L，HG组给予D-glucose30mmol/L，为了控制高渗透压对细胞实验结果的影响，MG组应用24.5mol/L甘露醇+D-glucose5.5mmol/L作为对照。各组细胞同步培养48小时后收集，应用western blot和real-time PCR方法检测gremlin1蛋白和mRNA在高糖环境足细胞中的表达；应用激光共聚焦显微镜观察gremlin1在足细胞中的分布情况及定位特点。 2重组gremlin1对高糖环境足细胞标志蛋白及凋亡的影响 应用重组的小鼠gremlin1细胞因子与高糖共同刺激足细胞，模仿生物体内高糖环境下gremlin1过表达的情形。①首先探讨gremlin1对高糖环境足细胞发生作用的最佳浓度和时间，即量效和时效关系实验。用高糖分别混合0、0.1、0.25、0.5、0.75、1μg/ml的gremlin1培养分化成熟的足细胞48小时，应用western blot和real-timePCR方法，找出gremlin1对足细胞nephrin和synaptopodin负性调控最明显的浓度作为下一步应用gremlin1的浓度依据。其次应用高糖混合最佳作用浓度的gremlin1因子分别培养成熟足细胞0、6、12、24、48、72小时，找出gremlin1对高糖环境足细胞nephrin和synaptopodin负性调控作用的最佳时间。②在最佳gremlin1作用浓度(0.75μg/ml)和时间(48h)条件下，分别设置正常对照（NC）、高糖对照(HG)和高糖+gremlin1(HG+grem1)对照，应用激光共聚焦显微镜观察gremlin1对足细胞nephrin和synaptopodin表达和定位的影响，直观分析gremlin1对足细胞的损伤作用。③设置对照如上，应用TUNEL检测gremlin1对足细胞凋亡的影响。计数TUNEL阳性细胞数。④应用western、real-time

SCH727965体内 ALK抑制剂 PCR方法检测Bcl-2、Bax、Cleaved Casepase-3等凋亡相关蛋白表达，以弥补TUNEL方法缺陷，与TUNEL一起共同评价gremlin1对高糖足细胞凋亡的影响。 3Gremlin1-siRNA对高糖环境足细胞标志蛋白及凋亡的影响 分化成熟的足细胞分为高糖组(HG)、高糖+gremlin1-siRNA组(HG+grem.siRNA)和高糖+对照siRNA组(HG+con.siRNA)。①优化转染条件，找出化学合成的gremlin1-siRNA沉默gremlin1基因表达的最佳剂量。②应用激光共聚焦显微镜观察gremlin1-siRNA对高糖环境足细胞nephrin和synaptopodin表达及定位的影响，评价gremlin-siRNA对足细胞的影响。③应用western blot和real time PCR的方法观察gremlin1-siRNA对高糖环境足细胞nephrin和synaptopodin表达的影响。④应用TUNEL方法观察gremlin1-siRNA对高糖环境足细胞凋亡的影响，并计数TUNEL阳性细胞。⑤检测gremlin1-siRNA对高糖环境足细胞Bcl-2、Bax和Cleaved Selleckchem Onalespib Caspase-3等凋亡相关蛋白表达的影响，进一步印证gremlin1-siRNA对足细胞凋亡的影响。 4介导gremlin1对高糖环境足细胞损伤的信号机制研究 ①由于在DN肾组织上发现TGF-β1和gremlin1表达共定位，因此我们研究高糖环境时二者之间是否存在特定关系。将分化成熟的高糖培养的足细胞分为两组，一组高糖培养基中加入重组的gremlin1细胞因子（0.75μg/ml）共同孵育48小时，检测TGF-β1的蛋白和mRNA表达情况（HG+grem1组）；另一组采用高糖培养基中加入重组的TGF-β1细胞因子（5ng/ml）共同孵育48小时，检测gremlin1的蛋白和mRNA表达情况（HG+TGF-β1组）；另外设置正常对照组（NC）和高糖对照组(HG)分别检测gremlin1和TGF-β1的表达。②与gremlin1相关的TGF-β信号分子的检测：用高糖与重组gremlin1（0.75μg/ml）共同孵育足细胞0、15、30、60、120、240分钟后，检测smad2/3、p-smad2/3、p38、p-p38、JNK1/2、p-JNK1/2等经典与非经典TGF-β信号分子，找出与gremlin1具有时效关系的信号途径进行阻断实验研究，以期发现其中的调控机制。③上述实验结果发现TGF-β/smad2/3信号途径与gremlin1作用相关。应用TGF-β1受体阻断剂SB431542阻断TGF-β1信号，观察TGF-β1受体阻断后对gremlin1抑制的nephrin和synaptopodin蛋白表达的影响。④应用smad2/3-siRNA转染高糖和gremlin1共同培养的小鼠足细胞，48小时后收获细胞，验证smad2/3敲减效果，并检测smad2/3敲减后对gremlin1抑制的nephrin和synaptopodin蛋白表达的影响。

结果： 1Gremlin1在高糖环境足细胞中的表达与分布 ①足细胞F-actin免疫荧光染色结果显示，在33℃，γ-IFN存在的许可条件下培养，足细胞呈梭形或三角形，细胞突起较少。在37℃，无-IFN的非许可条件下培养10-14天后，足细胞胞体上伸出大量足突，胞浆向四周展开，呈树枝状。Synaptopodin免疫荧光染色结果显示，未分化足细胞胞浆中synaptopodin的表达几乎没有，而分化10天后的足细胞中synaptopodin的表达明显增强，提示足细胞已分化成熟。②Western blot结果：在正常对照及甘露醇对照组，gremlin1蛋白表达很少，而HG组gremlin1表达明显上调(p<0.

410±0.052 vs 0.264±0.035,P
研究背景： 随着心脏移植、冠状动脉搭桥以及经皮冠脉介入等治疗手段广泛地应用于临床,心肌缺血再灌注损伤已成为临床上常见的一种病理生理现象。细胞凋亡在心肌缺血后即触发并因再灌注而加重,减少缺血和再灌注过程中心肌细胞凋亡可以挽救更多的心肌,提高心肌缺血后再灌注治疗的效果。 血红素氧合酶1(HO-1),是血红素氧合酶的诱导型,研究表明HO-1被诱导适应性表达能发挥抗细胞凋亡的作用。多种因素可通过信号转导通路ERK1/2或PI3K/Akt激活并促使红细胞系核因子-2相关因子-2(Nrf2)向核内转位、并与细胞核内抗氧化反应元件(ARE)上相应位点相互作用,上调HO-1的表达与酶活力,减轻各种应激状态下组织细胞的损伤。 IPI-145浓度 羟基红花黄素A (HSYA)是药用植物红花的最主要的有效成分。研究发现,HSYA可以减轻组织细胞的缺血再灌注损伤,可以抑制低氧诱导的内皮细胞凋亡目前尚未见到有关HSYA对缺血再灌注过程中心肌细胞凋亡的影响及其机制的研究报道。本研究探讨HSYA对缺氧/复氧诱导的H9c2心肌细胞凋亡的影响及其分子机制,分两部分进行。 第一部分羟基红花黄素A上调血红素氧合酶-1的表达抑制缺氧／复氧诱导的H9c2心肌细胞凋亡

目的： 利用体外细胞缺氧/复氧(A/R)模拟体内组织细胞缺血再灌注诱导H9c2心肌细胞凋亡,给予HSYA干预,探讨其对A/R诱导的心肌细胞凋亡的影响和其分子机制。 方法： H9c2心肌细胞随机分为对照组、A/R组、A/R并给予不同剂量(1、5、20、80μM) HSYA干预组,MTT法检测各组H9c2心肌细胞活力,酶联免疫分析法检测各组H9c2心肌细胞上清液肌钙蛋白Ⅰ浓度,蛋白免疫印迹技术测定各组H9c2心肌细胞HO-1蛋白表量。然后用随机分成的对照组、A/R组、A/R并给予HSYA20μM干预组、HO-1抑制剂(ZnPP-Ⅸ)组继续进一步的实验,测定各组H9c2心肌细胞的HO-1酶活力,FITC-Annexin

V/PI双染流式细胞术检测各组H9c2心肌细胞的凋亡率,蛋白免疫印迹技术测定各组H9c2心肌细胞HO-1蛋白表量、裂解的caspase-3 (CC3)表达量和细胞线粒体Bcl-2/Bax比值。 结果： 1.HSYA提高了经历A/R的H9c2心肌细胞的活力。 2. HSYA减轻了经历A/R的H9c2心肌细胞的损伤。 3. HSYA上调了经历A/R的H9c2心肌细胞的HO-1表达。 4. ZnPP-Ⅸ对HSYA上调经历A/R的H9c2心肌细胞的HO-1表达的作用没有明显影响。 Fulvestrant 5. HSYA上调经历A/R的H9c2心肌细胞HO-1的酶活力被ZnPP-Ⅸ抑制。 6. HSYA抗A/R诱导H9c2心肌细胞凋亡的作用被ZnPP-Ⅸ部分消除。 7. ZnPP-Ⅸ部分地消除了HSYA上调经历A/R的H9c2心肌细胞线粒体Bcl-2/Bax比值的作用。 8. ZnPP-Ⅸ部分地消除了HSYA降低经历A/R的H9c2心肌细胞CC3表达量的作用。 结论： HSYA通过上调HO-1的表达量和酶活力抑制A/R诱导的H9c2心心肌细胞凋亡从而减轻了细胞损伤。 第二部分羟基红花黄素A上调经历缺氧/复氧的H9c2心肌细胞血红素氧合酶-1的表达的信号转导通路 目的： 紧接着第一部分的研究工作,利用体外A/R模拟体内缺血再灌注诱导H9c2心肌细胞凋亡,并给予HSYA干预,探讨HSYA在抗A/R诱导的心肌细胞凋亡作用中上调HO-1表达的细胞信号转导通路机制。 方法： H9c2心肌细胞随机分为对照组、A/R组、HSYA 20μM干预组、HO-1抑制剂组,蛋白免疫印迹技术测定各组H9c2心肌细胞p-ERK1/2,

p-Akt蛋白表量。然后用随机分成的对照组、A/R组、HSYA 20μM干预组、P13K抑制剂(LY294002)组继续进一步的实验,蛋白免疫印迹技术测定各组H9c2心肌细胞p-Akt、HO-1、CC3蛋白表量和各组H9c2心肌细胞核蛋白中Nrf2的量。 结果： 1. HSYA和ZnPP-IX对经历A/R的H9c2心肌细胞的ERK1/2的磷酸化没有明显影响。 2. HSYA促进经历A/R的H9c2心肌细胞Akt磷酸化而ZnPP-Ⅸ对HSYA增强H9c2心肌细胞Akt磷酸化的作用没有明显影响。 3. HSYA促进经历A/R的H9c2心肌细胞Akt磷酸化的作用被LY294002阻断。 4.LY294002部分地阻断了HSYA上调经历A/R的H9c2心肌细胞HO-1表达的作用,并显著地削弱了HSYA降低经历A/R的H9c2心肌细胞CC3表达量的作用。 没有 5. HSYA促进经历A/R的H9c2心肌细胞Nrf2向核内转位的作用被LY294002部分阻断。 结论： HSYA减轻细胞损伤可能机制之一是通过激活PI3K/Akt信号转导通路,促使核因子Nrf2转位于细胞核内,与抗氧化反应元件上相应位点相互作用,从而上调血红素氧合酶1的表达和活性。
本研究以不同发育阶段的白刺参和青刺参为研究材料,利用生物学、组织学、分子生物学方法,对白刺参和青刺参进行比较研究。从生物学、组织学和分子生物学角度,综合探讨了刺参白化特征的发生机理。 1.白刺参体壁的基本营养成分(水分、灰分、粗蛋白、总脂肪、总糖)较青刺参无差异。青刺参成体体壁中黑色素含量约为白刺参的16倍,青刺参成体体壁中黑色素含量为干重的3.12%,而白刺参成体体壁中黑色素含量仅为干重的0.24%。在受精后第25、32、39、46、53天的稚参中,青刺参的黑色素含量较白刺参无显著差异。在受精后第60、74、81、88天的稚参中,青刺参的黑色素含量均显著高于白刺参。可见,刺参体壁黑色素的缺乏是导致刺参白化发生的直接原因。 2.刺参成体体壁由角质层(cuticle)、表皮层(epidermis)和内皮层(dermis)构成。相对于青刺参,白刺参成体体壁的黑色素细胞明显较少;白刺参成体体壁黑色素细胞中黑色素体的密度明显较小,且部分黑色素体为未有黑色素沉积的黑色素前体(pre-melanosome)。刺参稚参体壁已形成清晰的角质层(cuticle),表皮层(epidermis)和内皮层(dermis)结构。相对于青刺参,白刺参稚参体壁仅存在极少的黑色素细胞。白刺参稚参体壁黑色素细胞中黑色素体的发育程度极低,几乎不存在发育成熟的黑色素体,大多黑色素体为未有黑色素沉积的黑色素前体(pre-melanosome)。可见,黑色素细胞的缺乏及黑色素体中黑色素沉积的缺乏是刺参白化发生的组织学特征。 3.

7加入细胞因子IL-4和GM-CSF联合刺激的方法,取RAW264.7细胞4×105个铺入六孔板,加入IL-4(10ng/ml)和GM-CSF(20ng/ml)至DMEM细胞培养液,在常氧状态下37℃含5%CO2孵育箱中培养培养3天,在相差显微镜下观察细胞形态,并收集细胞约1-2×104个加CD86、CDllc、CD80及VEGFR1抗体以流式细胞学技术检测细胞表面表达CD86、CDllc、CD80的情况。 2取RAW264.7细胞4×105个铺入六孔板,加入IL-4(10ng/ml)和GM-CSF(20ng/ml)至DMEM细胞培养液,在常氧状态下37℃含5%CO2孵育箱中培养培养3天,收集细胞及细胞培养上清,提取RNA或细胞蛋白,以PCR技术、western blot技术、ELISA技术检测细胞VEGF mRNA、VEGFR1mRNA及蛋白、sVEGFR1表达,流式细胞学技术检测细胞表面VEGFR1蛋白表达。 3取RAW264.7细胞4×105个铺入六孔板,细胞培养液分别加入IL-4(10ng/ml,20ng/ml,40ng/ml)或GM-CSF(10ng/ml,20ng/ml,50ng/ml),并设空白组(仅有RAW264.7细胞,无任何细胞因子),在37℃含5%CO2常氧状态下孵育箱中培养3天,收集细胞及细胞培养上清,提取RNA或细胞蛋白,以PCR技术、western blot技术、ELISA技术检测细胞VEGF mRNA、VEGFR1mRNA及蛋白、sVEGFRl表达。

第二部分： 1取两组RAW264.7细胞分别以IL-420ng/ml或GM-CSF20ng/ml浓度加入培养液,在37℃常氧、含5%CO2条件下孵育15min,30min,1h,收集细胞,提取蛋白,以western blot技术检测细胞中P38磷酸化表达,以检验在细胞因子的刺激下细胞中是否有P38信号通路的激活。 哪里 2取SB203580(1：1000)加入细胞培养液,将RAW264.7细胞在孵育箱中培养1h,去除含SB203580的培养液,重新加入按实验要求含不同刺激因子的培养液,在37℃含5%CO2常氧状态下孵育箱培养3天后收集细胞及细胞培养上清,提取RNA或细胞蛋白,以PCR技术、western blot技术、ELISA技术检测细胞VEGF mRNA、VEGFR1mRNA及蛋白、sVEGFRl表达。

第三部分： 1取RAW264.7细胞4×105个铺入六孔板,加入IL-4(10ng/ml)和(GM-CSF(20ng/ml)至DMEM细胞培养液,在常氧状态下37℃含5%CO2孵育箱中培养3天,收集细胞,提取RNA或细胞蛋白,以PCR技术、western blot技术检测细胞Gadd45amRNA、gadd45a蛋白表达。 2取RAW264.7细胞4×105个铺入六孔板,细胞培养液分别加入IL-4(10ng/ml,20ng/ml,40ng/ml)或GM-CSF(10ng/ml,20ng/ml,50ng/ml),并设空白组(仅有RAW264.7细胞,无任何细胞因子),在37℃含5%CO2常氧状态下孵育箱中培养3天,收集细胞,提取RNA,以PCR技术检测细胞Gadd45a mRNA表达。 3采用RNA小干扰技术,用Gadd45a-SiRNA转染RAW264.7细胞使Gadd45a基因表达沉默,在要求时间内提取细胞RNA,检测转染效率,并将Gadd45a基因沉默后的RAW264.7细胞4×105个铺入六孔板,加入IL-4(10ng/ml)和GM-CSF(20ng/ml)至DMEM细胞培养液,在常氧状态下37℃含5%CO2孵育箱中培养,规定时间内收集细胞及培养上清,提取细胞RNA,以PCR技术、ELISA技术检测细胞Gadd45基因表达正常或沉默条件下VEGFR1mRNA, VRT752271购买 sVEGFRl表达。 结果： 1细胞培养3天后相差显微镜下观察：加入细胞刺激因子IL-4和GM-CSF的细胞体积变大,胞核变大,细胞形态呈现多样化,并且伸出长长的伪足,形状类似不成熟树突状细胞(immature

DC)流式细胞学技术检查细胞膜表面共刺激分子CDllc、CD86、CD80表达升高,表示RAW264.7在IL-4和GM-CSF联合刺激下向未成熟DC样细胞发育。 2未成熟DC样细胞较RAW264.7细胞表达高水平的VEGFR1mRNA及VEGFR1蛋白,细胞膜表面VEGFR1蛋白表达无显著差异,sVEGFR1表达显著增高,但是VEGF mRNA表达下调,表明抗血管生成性能增加。 3IL-4能提高RAW264.7细胞中VEGFR1mRNA和VEGFR1蛋白的表达及减少细胞膜表面膜联蛋白VEGFR1表达,上调sVEGFR1水平。GM-CSF没有增加VEGFR1mRNA表达,但提高VEGFR1的蛋白表达,膜联蛋白VEGFR1表达略有增高,sVEGFR1水平增加,增高幅度小于IL-4。两种刺激因子均对VEGF 所以 mRNA表达无明显影响。细胞因子剂量的不同对细胞因子的作用结果无显著差异。 4两种细胞因子作用15min即可看到P38信号通路在RAW264.7细胞内开始激活。SB203580使得未成熟DC样细胞表达VEGFR1mRNA减少,但是sVEGFRl水平升高。SB203580使用后,IL-4和GM-CSF刺激RAW264.7细胞表达VEGFR1mRNA下降,IL-4刺激细胞表达sVEGFRl水平下降,但是GM-CSF却刺激细胞表达sVEGFR1水平略有上升,两种因子刺激后的细胞膜表面膜联蛋白VEGFR1表达较RAW264.7细胞无明显差别。 5未成熟DC样细胞较RAW264.7细胞表达高水平的Gadd45a mRNA及Gadd45a蛋白。 6Gadd45a基因沉默的未成熟DC样细胞较Gadd45a基因表达正常的未成熟DC样细胞表达下调的VEGFR1mRNA及sVEGFR1水平。 结论 1RAW264.7细胞在IL-4和GM-CSF联合刺激下,向未成熟DC样细胞发育的同时伴随着VEGFR1mRNA表达上调及sVEGFR1增高,但VEGF mRNA表达下降显示了在此过程中细胞的抗血管形成功能逐渐上升。 2两种因子对细胞的sVEGFR1上调机制各不相同：IL-4能提高VEGFR1mRNA表达、VEGFR1蛋白的翻译及sVEGFR1水平,同时减少细胞膜上膜联蛋白VEGFR1表达,提示IL-4可能增强TACE活性从而增强其主导的胞外功能域脱落的蛋白水解作用,使得sVEGFR1表达增强。GM-CSF没有增加VEGFR1mRNA表达,但提高VEGFR1的蛋白表达,使得sVEGFR1水平增加。 3IL-4刺激RAW264.7细胞的VEGFR1mRNA表达及sVEGFR1水平表达与P38信号通路密切相关；GM-CSF刺激RAW264.7细胞的sVEGFR1分泌增高有着多种信号通路的参与,其中SB203580可能与其他信号通路有cross-talk使得sVEGFRl分泌机理更复杂。 4在RAW264.7细胞向未成熟DC样细胞发育的过程中,Gadd45a mRNA和Gadd45a蛋白表达增高,当RAW264.

More importantly,the PI3K/AKT pathway is composed 确认细节 of multiple bifurcating and converging kinase cascades,providing many potential targets for cancer therapy.Renal cell carcinoma(RCC) is a high-risk and high-mortality cancer that is notoriously resistant to traditional chemotherapies or radiotherapies.The PI3K/AKT pathway is modestly mutated but highly activated in RCC,representing a promising drug target.Indeed,PI3 K pathway inhibitors of the rapalog family are approved for use in RCC.Recent large-scale integrated

analyses of a large number of patients have provided a molecular basis for RCC,reiterating the critical role of the PI3K/AKT pathway in this cancer.In this review,we summarize the genetic alterations of the PI3K/AKT pathway in RCC as indicated in the latest large-scale genome sequencing data,as well as treatments for RCC that target Tofacitinib 价格 the aberrant activated PI3K/AKT pathway.
目的:探讨巨噬细胞活化过程中P i m-1的动态表达及抑制磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K),P38丝裂原活化蛋白激酶(P38

mitogen-activated protein kinase,P38MAPK),Janus家族酪氨酸激酶2(Janus kinase 2,JAK2),细胞外信号调节激酶(extracellular regulated protein kinase 1/2,ERK1/2)信号关键分子后Pim-1的表达情况.方法:利用q-RT PCR、Western

blot技术检测经脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)处理后0、1、2、4、8、12、24 h巨噬细胞中P i m-1m R N A及蛋白的动态表达及P I3K、P38MAPK、JAK2及MEK1/2抑制剂对Pim-1蛋白表达的影响.结果:巨噬细胞中Pim-1的表达随LPS不同作用时间而改变,Pim-1 m RNA表达在LPS刺激后2 h达到高峰,为基础值6倍,12 h后Pim-1 m RNA表达回落至基础水平,LPS刺激1-8 h内Pim-1蛋白表达水平增高,12 h后P i m-1蛋白表达回落至基础水平;P I3K、P38MAPK、JAK2及MEK1/2抑制剂均能下调巨噬细胞中Pim-1蛋白水平.结论:Pim-1 m RNA、Pim-1蛋白的表达是巨噬细胞活化过程中的早期事件;PI3K、P38MAPK、JAK2及MEK1/2抑制剂均影响巨噬细胞中Pim-1的表达,提示Pim-1为相关信号通路的下游分子.
An efficient synthesis of novel 3-(piperidin-4-yl)isoxazolo[4,5-d]pyrimidine scaffold PF-02341066半抑制浓度 has been designed and deveopled. A series of 5-phenylurea derivatives was synthesized using this method. Their cytotoxic activities against breast cancer cell line BT-474 were evaluated by CCK-8 assay. Most of them showed potent anti-proliferative activities, of which compound 20 and 21 exhibited IC50 s of 1.565 mmol/L and1.311 mmol/L, respectively. Furthermore, compound 20 and 21 also showed potent inhibitory activities against PI3 Kd with IC50 s of 0.286 mmol/L and 0.452 mmol/L, respectively.