05)。在再灌注15min后,Sevo、Post、Sevo+Post血流动力学参数明显高于对照组及其它各组(P＜0.05);但三组间比较,无明显统计学意义。LY、LY+Sevo、LY+Sevo+Post、PD、PD+Sevo、DMSO组在再灌注期血流动力学参数与Control组比较,差异无统计学意义。 2、对心肌梗死面积的影响 在再灌注末,与Control组(43±3%)比较,Post组(28±3%)和Sevo组(31±2%)心肌梗死面积明显减少(P＜0.05)。另外,Post+Sevo组(26±4%)梗死面积也明显减少(P＜0.05),但这三组间差异无统计学意义。虽然LY294002及其溶剂DMSO对梗死面积并无影响(分别为40±3%和43±2%),但是前两者能够取消七氟烷后处理、缺血后处理、七氟烷加缺血后处理对心肌保护作用。LY+Post、LY+Sevo、LY+Post+Sevo各组的梗死面积分别为41±2%、43±3%42±2%,与Control组比较无统计学意义。 PD98059组的情况同LY294002。 3、对磷酸化Akt和GSK3β的影响 和 与Sham组和Control组比较,Sevo组磷酸化Akt和GSK3β的表达明显增加(P＜0.05)。在Post组和Post+Sevo组也可以看到类似的结果(P＜0.05),但这三组间比较无统计学意义。给予LY后,LY、LY+Sevo、LY+Post、LY+Sevo+Post组的磷酸化Akt和GSK3β的表达则明显减少,低于Control组(P＜0.05),但与Sham组比较无统计学意义。DMSO组磷酸化Akt和GSK3β的表达与Control组比较无统计学意义。
4、对磷酸化ERK1/2的影响 与Sham组相比,Control、Post、Sevo、DMSO组p-ERK表达量显著升高(P＜0.05),而PD组和PD+Sevo组p-ERK1/2表达量无统计学意义。与Control组比较,Post组和Sevo组的p-ERK1/2表达量进一步增加(P＜0.05)。但这两组间比较差异无统计学意义。PD组和PD+Sevo组明显低于Control组(P＜0.05)。 Linsitinib临床试验 5、对浆膜下线粒体形态学的影响 电子显微镜下可见,Sham组线粒体形态大都呈椭圆形或圆形,基质密度低,脊排列比较紧密;Control组线粒体高度肿胀,基质密度低,多数外膜因缺血破损,自溶。同Control组比,Post组和Sevo组,线粒体形态比较完整,表现为线粒体数量较多,肿胀减轻,外膜较完整,基质密度增加。形态学半定量分析也表明Sevo组、Post组心肌线粒体损伤程度比对照组Control明显减轻(P＜0.05)。但这两组间差异无统计学意义。PD、PD+Sevo以及DMSO组与Control组比较也无统计学意义。
6、对心肌细胞凋亡的影响 再灌注15min后Sham组未见明显细胞凋亡,心肌细胞凋亡指数仅(4.1±1.1)%。Post组和Sevo组心肌细胞凋亡指数分别为(12.6±2.4)%、(13.8±2.7)%,明显低于Control组的(38.2±9.0)%(P＜0.05),但Post组和Sevo组间比较无统计学意义。 7、对线粒体膜电位的影响 再灌注15min后,Sham组正常鼠心肌细胞线粒体膜电位较高(1.875±0.375),心肌细胞数量也较多。相反,Control组心肌细胞数量显著减少,膜电位明显降低。与Control组(1.149±0.287)比较,Post组(1.534±0.318)和Sevo组(1.507±0.321)膜电位保持在较高水平(P＜0.05),心肌细胞损伤较轻,两组比较无统计学意义。
无 8、对CytC和Caspase-3的影响 与Sham相比,其它各组线粒体CytC水平降低,胞质CytC水平升高(P＜0.05)。与Control组相比,在再灌注末,Post和Sevo组线粒体CytC的水平较高,胞质CytC水平较低(P＜0.05)。但Post和Sevo组的线粒体、胞质中CytC的水平差异无统计学意义。 与Sham相比,在再灌注末,其它各组Caspase-3的表达明显增强(P＜0.05)。而与Control组相比,Post和Sevo组Caspase-3的表达明显减弱(P＜0.05),两组比较差异无统计学意义。 结论 1、七氟烷后处理可以增加大鼠心肌冠脉流量,减少缺血的梗死面积,促进缺血心肌的功能恢复,提高缺血心肌Akt、GSK3β、ERK1/2磷酸化水平,减少细胞线粒体损伤,与缺血后处理的作用相当。PI3K特异性阻断剂LY294002和ERK1/2特异性阻断剂PD98059可以取消七氟烷后处理和/或缺血后处理的保护作用。表明七氟烷后处理不但激活了PI3K途径,而且还激活了ERK1/2途径来发挥保护作用。 2、七氟烷后处理联合缺血后处理对缺血心肌有较好的保护作用,其强度与七氟烷后处理或缺血后处理作单一处理时相当。表明两种后处理联合应用并不增加额外的保护效应。 3、在缺血再灌注过程中,七氟烷后处理抑制缺血心肌线粒体膜电位的下降,阻止线粒体细胞色素C的释放,降低缺血心肌caspase-3活性,减少心肌细胞凋亡。表明七氟烷后处理通过多个位点减少细胞凋亡是其保护缺血心肌的重要机制之一。
原发性高血压(essential hypertension,EHT)是当今社会最常见的心血管疾病,与冠心病、脑卒中、心力衰竭和肾功能障碍密切相关,是导致多种心血管疾病死亡的主要危险因素之一,其患病率在我国有逐年增高的趋势。线粒体病由于突变的线粒体逐渐积累,导致线粒体氧化磷酸化功能受损,细胞功能下降。线粒体tRNA突变是线粒体疾病的研究热点之一。线粒体含有22种tRNA。既往的研究也发现原发性高血压具有家族聚集倾向性,其中一些具有明显母系遗传特点,而且线粒体疾病往往同时表现血压升高,提示我们线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)突变可能与血压升高有一定的相关性。 我们对2000名原发性高血压患者进行了测序分析,其中发现一个具有典型母系遗传特点的大家系,我们收集了5代104人,其中母系成员27人。我们对家系成员的一般情况、血压等进行测量和统计,对其中42A人进行全身体格检查、采血进行生化和心脏超声检查。结果发现该家系中母系成员高血压患病率高达55.6%,非母系成员高血压患病率15.6%(P＜0.01);母系成员高血压发病年龄有提前的趋势(Ⅱ代62.0±6.2岁;Ⅲ代46.3±5.8岁;Ⅳ代23.3±2.9岁);母系成员血压与年龄、吸烟、饮酒和高盐饮食有明显相关性(P＜0.05);母系成员血糖、总胆固醇、血钠明显高于非母系成员(P＜0.