采用RTFQ-PCR检测沉默hsa_circ_0005320后TNBC细胞中hsa_circ_0005320的表达;采用细胞计数试

采用RTFQ-PCR检测沉默hsa_circ_0005320后TNBC细胞中hsa_circ_0005320的表达;采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)和EdU实验检测细胞增殖;采用流式细胞术、Hoechst 33342、Tunel实验检测细胞凋亡;采用流式细胞术检测细胞周期;采用蛋白质印迹法(Western b不要lot)检测LIF-STAT3通路相关蛋白的表达情况。结果 hsa_circ_0005320在TNBC组织和细胞中显著高表达;在TNBC细胞中沉默hsa_circ_0005320后其表达量显著降低,细胞增殖能力下降,促进细胞凋亡,导致细胞周期阻滞在G1期,且LIF、P-STAT3蛋白表达水平明显下降。结论
[目的]探AZD7762讨萝卜硫素与索拉菲尼联合对肝癌Hep G2细胞生长抑制及凋亡的作用,并观察其可能的机制。[方法]细胞计数试剂盒8(CCK8)法分析了萝卜硫素、索拉菲尼及两者联合给药对Hep G2细胞增殖抑制率的影响,计算每种药物的半数抑制浓度(IC50)及联合时的联合指数(CI);流式细胞仪检测了Hep G2细胞凋亡情况;免疫蛋白印记(WAZD1080购买estern Blot)检测了细胞周期蛋白D1(Clin D1)、C-myc、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)及磷酸化核因子κB抑制蛋白α(p-IκBα)蛋白表达水平。[结果]萝卜硫素与索拉菲尼联合对Hep G2细胞增殖抑制作用和凋亡诱导作用显著高于各单独给药(P<0.05),还表现出浓度依赖性,呈现出明显的协同作用(CI值<1)。

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