肽基精氨酸去亚胺酶4(PADl4)是2004年发现的组蛋白去甲基化酶,负责组蛋白精氨酸残基上单甲基化的去甲基化,并催化精氨酸变成瓜氨酸；同时调节非组蛋白的去甲基化,例如EP300、RPS2、ING4和nucleophosmin/B23等。CFLAR是CASP8/10特异的抑制蛋白,能被招募到DISC上,抑制PROCASP8/10切割活化。CFLAR在多种肿瘤如肝癌、结肠癌、黑色素瘤更多、卵巢癌中高表达；很多小分子药物通过降低CFLAR蛋白水平诱导细胞凋亡,所以CFLAR是一个很有前景的肿瘤治疗靶标。研究表明CFLARL与XRCC6结合而稳定CFLARL,乙酰化的XRCC6干扰CFLARL/XRCC6复合物的形成,从而促使CFLARL泛素化降解。但是目前仍不确定CFLARL存在乙酰化修饰。质谱实验表明CFLARL含有一个甲基化位点。我们的而且目的是确定CFLARL是否存在乙酰化和甲基化修饰,并研究翻译后修饰的CFLARL在细胞中的作用和调控机制。研究方法1.利用siRNA干扰和基因过表达实验研究特定蛋白在信号转导通路中的作用；2.利用SRB实验检测肿瘤细胞存活率；3.利用western Blot实验检测细胞内相关蛋白表达水平；4.利用免疫共沉淀和GST pull down实验研究蛋白间相互作用selleck抑制剂和特定蛋白的翻译后修饰；5.利用流式细胞术检测细胞凋亡；6.利用荧光显微镜观察蛋白在细胞中的定位。实验结果1.蛋白酶体抑制剂PS-341显著诱导DDIT3表达,并呈剂量和时间依赖性。2.在DDIT3 siRNA转染的细胞中,PS-341诱导的TNFRSF10B水平明显降低,CASP8、CASP9、CASP3、PARP1的切割片段减少；流式细胞分析法检测细胞凋亡,发现在DDIT3 siRNA转染的细胞中,PS-341诱导的细胞凋亡降低。