结论:PKC激活剂PMA促进膀胱癌细胞增殖能力,而PKCα抑制剂抑制膀胱癌细胞增殖能力,说明PKCα在膀胱癌增殖中起重要作用,而PKCδ抑制剂促进膀胱癌增殖,说明PMA促进膀胱癌增殖可能是因为激活PKCα亚型,也说明PKCα抑制剂对其它亚型无太大抑制作用。所以我们认为PKCα激活在膀胱癌增殖中起关键性作用,Screening Library抑制其活性可明显抑制膀胱癌细胞增殖能力,推测是通过立早基因c-fos与c-jun起调节作用。 第二部分 目的:进一步探讨PLCε-PKCα信号通路在膀胱癌增殖中的调控及机制。 方法:PLCεshRNA转染膀胱癌BIU-87细胞株,RT-PCR检测对内源性PLCε沉默情况,MTT法检和测对细胞增殖能力影响,Western测定PKCα活性变化,RT-PCR及Western检测下游蛋白c-fos、c-jun表达变化;PKC抑制剂与激活剂处理转染shRNA细胞,MTT观察对增殖活力。 结果:转染PLCεshRNA可明显抑制膀胱癌BIU-87细胞内源性PLCε表达;转染此网站PLCεshRNA可明显抑制可明显抑制膀胱癌BIU-87细胞增殖活力、细胞周期被阻滞于G0/G1期,并使PKCα活性降低及立早基因c-fos、c-jun的表达减少;转染PLCεshRNA对膀胱癌细胞的抑制能力可被PKC激活剂PMA逆转,但如在加入PMA前或同时加入PKCα特异性抑制剂Safingol,则不会被逆转,而加入PKCδ抑制剂Rottlerin仍可被逆转。