用针对JEV NS1蛋白不同位点的单克隆抗体杂交瘤细胞株(5H2和2F6)制备腹水,经Protein G纯化后,以5H2包被酶标板作为捕获抗体,HRP标记的2F6为检测抗体。ELISA条件优化的结果显示,捕获抗体和酶标抗体最佳浓度分别为25和2.296μg/mL。用该方法检测系列稀释的NS1蛋白,蛋白浓度范围在78.125～625.000 ng/mL时,以及检测OD_(450)值和蛋白浓度之间具有良好的线性关系,说明该方法可用于NS1蛋白的定量检测。用该方法检测猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒等均显示阴性,说明特异性良好。重复性试验结果显示,该方法批内重复性为0.7%～2.6%,批间重复性为0.6%～2.1%。用该方法检测了JEV感染的小鼠(Mus musculuAS1842856核磁s)脑组织匀浆,在小鼠发病期可明显检测到NS1蛋白。本研究建立了检测JEV NS1蛋白的ELISA方法,为该病毒的诊断提供了一种工具。
<正>原发性膜性肾病(Primary membranous nephropathy,PMN)又称为特发性膜性肾病(Idiopathic membranous nephropathyselleck化学,IMN)约占成人MN80%,占原发性肾小球疾病的10%以上[1-5]。通常起病隐匿,临床上以肾病综合征或无症状性蛋白尿为主要表现[6-8]。IMN是成人慢性肾脏病的最常见病理类型之一,属于难治性疾病,约有1/3的患者可自发缓解,但高达40%～50%患者在5～15年内进展至终末期肾病[9]。给个人及社会造成严重的负担。因此必须提高对该
目的 分析上海宝山区9项呼吸道病原体IgM抗体的检出情况。