将上述检测方法与国外诊断试剂盒进行比对,结果表明使用的现场快速诊断检测试剂敏感性与特异性复合率较高,成功开发建立了动物疫病现场快速诊断与远程监测平台,探索了我国跨境地区种畜禽场动物疫情监测新模式,为我国边境地区的养殖场动物疫病防控净化机制建设提供数据支持与技术支撑。
原核表达牛病毒性腹泻病毒(BVDhttps://www.selleck.cn/ATM.htmlV)NS3蛋白,并以此免疫动物制备多克隆抗体。对BVDV NS3蛋白的抗原决定簇氨基酸序列分析,构建重组质粒pET30a-NS3,转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞中,使用IPTG诱导目的蛋白表达。选择最优诱导条件对目的蛋白进行亲和纯化,目的蛋白主要以包涵体形式表达,从而获得Tozasertib molecular weightNS3蛋白。使用NS3蛋白免疫新西兰大白兔,制备兔抗NS3蛋白多克隆抗体,采用ELISA方法检测多克隆抗体效价。结果显示,成功表达并纯化出BVDV NS3蛋白,制备的兔抗NS3蛋白多克隆抗体效价大于1∶128 000,为建立BVDV抗体/抗原检测方法及疫苗的研究奠定了基础。
还有 为了获得一定纯度及浓度的布鲁菌分泌蛋白BspG,制备其多克隆抗体。首先通过生物信息学方法分析预测BspG蛋白序列特征及功能域;采用原核表达的方式获得BspG蛋白,纯化好的BspG蛋白混入弗氏佐剂后分4次免疫试验兔制备多克隆抗体; Western blot鉴定BspG蛋白免疫原性,方阵滴定法确定间接ELISA最佳抗原抗体工作浓度,进而评定BspG蛋白多克隆抗体效价。