利用分化诱导剂PMA诱导及实时定量PCR技术检测白血病细胞分化标志物CD11b的mRNA表达水平,发现HLTF低表达组白血病细胞的分化能力显著高于对照组,而HLTF过表达组白血病细胞的分化能力显著低于对照组。这些结果表明HLTF可促进白血病细胞的增殖,抑制白血病细胞的分化,在白血病细胞中起着癌基因的作用。我们预测到HLTF可能存在SUMO修Inhibitor Library饰,利用蛋白质免疫共沉淀技术检测到HLTF主要被SUM02修饰,免疫荧光实验表明HLTF与SUMO2及E2结合酶UBC9共定位于细胞核内,进一步验证了 HLTF与SUMO2的相互作用。我们通过蛋白质免疫共沉淀技术检测到介导HLTF SUMO化修饰的E3连接酶主要为PIAS2α,免疫荧光实验显示HLTF与PIAS2αTariquidar研究购买共定位于细胞核内,而介导HLTF去SUMO化修饰的特异性蛋白酶主要为SENP2。我们进一步利用点突变载体构建及蛋白质免疫共沉淀实验确定了 HLTF的SUMO化修饰位点为第515位赖氨酸残基(K515)。这些结果显示HLTF通过PIAS2α完成SUMO化修饰,通过SENP2完成去SUMO化修饰,其SUMO化修饰位点为Selleck AZD0156K515位。我们通过蛋白质免疫共沉淀技术检测到SUMO化修饰可促进HLTF的泛素化降解,从而降低HLTF蛋白的稳定性。我们也检测了 PML在HLTF的SUMO化修饰中的作用,结果发现PML可促进HLTF的SUMO化修饰,从而使HLTF通过泛素化途径降解,免疫荧光实验表明HLTF与PML共定位于细胞核内。蛋白质免疫共沉淀实验结果表明RNF4可作为HLTF的E3泛素连接酶促进HLTF的泛素化降解。