为构建糯玉米品种DNA指纹库,保护品种资源,利用Illumina公司研发的包含56 110个SNP标记的芯片,对50份糯玉米自交系进行基因分型。结果表明 按照SNP标记选用标准,共得到42 406个SNP标记。这些标记的杂合率均值为0.04,SNP缺失率均值为0.01,最小等位基因频率(MAF)均值为0.4,多态性信息含量(PIC)均值为0.38,基因多样性指数均值为0.4Elacridar临床试验4。对上述获得的SNP标记设置不同数量位点进行筛选,确定25 000位点为核心标记位点,可用于构建糯玉米自交系DNA指纹库。在25 000位点时,对50份糯玉米自交系进行SNP聚类分析,共将其划分为四大类群,聚类结果与品种系谱来源一致。该研究可为糯玉米品种特异性和一致性的鉴定分析及品种保护工作提供理论指导。
为构建一种核酸免疫胶体金的制备方法,selleck screening library将抗体与寡核苷酸共价连接,并与含互补序列的寡核苷酸修饰的胶体金杂交。紫外扫描检测显示,使用4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐(SMCC)共价偶联修饰的抗体-核酸,抗体分子修饰核酸的数量最多。通过蛋白定量、琼脂糖凝胶电泳、盐沉、pH调节等试验,比较核酸免疫胶体金和传统静电吸附方式制备的免疫胶体金的抗体结合率、目标捕获率以及探针的稳点击此处定性,并初步测试了新型探针在试纸条检测上的应用。结果表明 构建的核酸免疫胶体金的抗体结合率比传统免疫胶体金高20%,探针捕获目标的效率高40%(以蓝耳病毒为例),稳定性更好(0.5～1 mol·L~(-1)盐浓度及pH 4～10),试纸条检测有明显特异性(以蓝耳病毒为例)。这一研究成功构建了一种具有更好抗体负载率、靶病毒结合率、稳定性的核酸免疫胶体金,有望替代传统的免疫胶体金,制备更稳定更灵敏的试纸条,用于抗原、抗体及病毒的快速检测。