为制备免疫学特性良好的大豆Bowman-Birk胰蛋白酶抑制因子(BBI)单克隆抗体(mAb),以50μg/只的免疫剂量将BBI免疫BALB/c小鼠,采用间接ELISA和间接竞争ELISA试验鉴定多抗血清效价和敏感性。选择血清效价和敏感性较优的小鼠进行细胞融合,多次筛选得到分泌BBI m Ab的稳定杂交瘤细胞株。采用体内诱生腹水法制备BBI mAb并对signaling pathway其免疫学特性进行鉴定。结果表明 1号小鼠经免疫后效价最高且敏感性最好,半数抑制浓度(IC50)为868.58 ng/mL。经细胞融合筛选得到5株杂交瘤细胞,其中3B7-B10 mAb效价达到1∶4.096×105以上,亚型为IgG1型,IC50为83.07 ng/mL,具有亲和力较高且特异性强的优点,表明所制备的mAb免疫学特性良好,不要能够为建立大豆及其制品中BBI的免疫学检测方法提供良好的抗体基础。
目的比较间接法和双抗原夹心法丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)酶联免疫吸附试验试剂的性能。方法收集2018年6月—12月在本检验所采用间接和双抗原夹心ELISA法诊断试剂进行平行抗-HCV检测的血浆样本1 875份,初次检测结果为反应性时,使用原试剂进行双孔复selleck screening library查。采用Chiron RIBA确证试剂对两种试剂中任意一种检测为阳性或可疑的标本进行检测,把RIBA试验结果为阳性的标本再用两代ELISA试剂检测,对得到的S/CO进行比较。结果双抗原夹心法ELISA诊断试剂的阳性检出率为1.71%,假阳性率为3.13%,准确度为93.75%;而间接法ELISA诊断试剂的阳性检出率为3.36%,假阳性率为96.88%,准确度为47.62%,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05)。