ERα mRNA水平表达同样随NNK作用时间的延长呈上升趋势,其中第30周、第34周差异显著,具有统计学意义(P＜0.01)。(3)Western blot检测结果显示,在NNK诱导的A/J小鼠肺癌发展过程中,CYP1B1表达明显增加,并且CYP1B1表达增加的时间和趋势部分与ERα变化重叠。基因水平检测显示,NNK诱导第34周时的小鼠肺组织中ERα、CYP1B1编码Nirogacestat基因的水平分别较对照组增加8倍、6倍。基因芯片信号通路分析发现,ERα、Cyp1b1共同参与了NNK诱导的小鼠肺癌发生,二者参与的信号通路共8条,其中包括ERK/MAPK信号通路。基因芯片网络分析结果显示,在NNK诱导的肺癌发生发展过程中有3个功能不同的高分值(>15)基因网含有ERα和Cyp1b1,其中ERα和Cyp1b1同时参与药物代谢和Semaxanib分子量小分子生物化学反应。这与二者的生物学功能有关,也可能与NNK代谢有关。(4)(a)体外研究结果显示,NNK处理后的NCI-H23、NCI-H460细胞中ERα、CYP1B1表达上调,其中ERα主要在细胞核中表达,细胞核蛋白中ERα表达增幅较对照组高。该结果与在NNK处理的A/J小鼠肺组织及人肺肿瘤组织中所获得的数据相符。(b)先转染CYP1BCrenigacestat花费1 siRNA和ERα siRNA后加NNK处理的NCI-H23、NCI-H460细胞凋亡率明显上升,转染了CYP1B1 siRNA的NCI-H460细胞凋亡率甚至高达80%。同时,经过转染CYP1B1 siRNA的细胞与没转染的对照组相比NNK导致的ERα上调受到明显抑制,而转染ERαsiRNA的细胞中CYP1B1几乎无变化。说明,抑制CYP1B1表达可以减少ERα,但阻断ERα的表达并不能削弱NNK对CYP1B1的影响。